Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição 3

Bolsista: RUAMA GABRIELA FELIX DAS NEVES
Orientador(a): NUBIA BOECHAT ANDRADE
Resumo: O tratamento das leishmanioses ainda é desafiador, pois depende de variantes tais como a forma da doença, o parasito, a localização geográfica e a complexidade da doença. Os tratamentos existentes ainda apresentam muitas limitações tais como a elevada toxicidade dos fármacos empregados, o alto custo, o desenvolvimento de resistência aos medicamentos em algumas regiões, a baixa eficácia e efeitos colaterais indesejáveis, o que dificulta adesão ao tratamento. Os medicamentos atuais usados no combate do parasita Leishmania sp. incluem as drogas de primeira linha, como os antimoniais pentavalentes (antimoniato de meglumina e estibogluconato de sódio), pentamidina, anfotericina B, miltefosina, paramomicina e alguns derivados azólicos (cetoconazol, fluconazol e itraconazol). Muitos dos novos compostos que vem sendo identificados como promissores contra leishmaniose apresentam em sua estrutura sistemas heterocíclicos nitrogenados, indicando a relevância e diversificada aplicabilidade desses sistemas em química medicinal, sendo de grande valia para o incentivo ao planejamento e síntese de novos derivados com potencial atividade anti-Leishmania. Dando continuidade aos esforços de nosso grupo de pesquisa na busca por novos compostos heterocíclicos ativos contra doenças negligenciadas, esse projeto visa a síntese e a avaliação da atividade anti-Leishmania e citotóxica de novos derivados contendo anéis análogos de purinas capazes de atuar sobre alvos moleculares de Leishmania sp. (e. g.; proteassoma, DHODH, NTR, arginase). O presente projeto utiliza fundamentos da química orgânica sintética no desenvolvimento de rotas reacionais mais promissoras, com intuito de desenvolver compostos mais seletivos diante dos alvos do parasita Leishmania sp.. Como resultado, até o momento do desenvolvimento deste trabalho, foi possível definir a metodologia mais eficaz para obtenção dos amino-1,2,4-triazóis 7a-c e prepará-los com bons rendimentos e pureza. A síntese das aril-3-oxo-propanonitrilas 8b foi realizada através do acoplamento oxidativo catalisado por cobre II e seguimos o aumento de escala dessa reação para podermos produzir quantidades maiores dessas moléculas que serão muito úteis em outros projetos. Entretanto, a tentativa de obter os intermediários com o anel [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidina 9a-f por meio da reação das aril-3-oxo-propanonitrilas 8b com os amino-1,2,4-triazóis 7a-c ainda não foi concluída com sucesso. Porém, uma rota alternativa para síntese dos intermediários 9a-f foi sugerida e os resultados têm se mostrado promissores. Foram sintetizados derivados do sistema pirazolo[1,5-a]pirimidina (20a-b), similares aos compostos 9a-f, através da condensação entre o 3-metil-5-aminopirazol e as aril-3-oxo-propanonitrila em bons rendimentos. No momento a reação de acoplamento entre estes compostos e derivados de ácido carboxílico (espaçadores sugeridos no projeto) estão em desenvolvimento. As moléculas finais da série das acil-hidrazidas 27a-f e 28a-f também estão sendo sintetizadas e a molécula final 27a já foi obtido uma. As etapas realizadas até agora estão dentro do cronograma de execução do projeto. Posteriormente, esses compostos serão submetidos a ensaios biológicos para avaliação de citotoxicidade e eficácia de sua atividade. A expectativa é obter resultados positivos, que contribuam no combate à Leishmaniose, corrigindo falhas existentes em seu tratamento e ampliando a possibilidade de uso dessas moléculas desenvolvidas em projetos futuros do nosso grupo de pesquisa.

Bolsista: ESTEFFANIE MACHADO DA SILVA ALVES
Orientador(a): TATIANA WARGAS DE FARIA BAPTISTA
Resumo: O Censo Psicossocial dos usuários dos serviços de saúde mental do Estado do Rio de Janeiro insere-se como uma iniciativa do grupo Luta Antimanicomial e Feminismos da Escola de Serviço Social da Universidade Federal do Rio de Janeiro em parceria com o Instituto de Saúde da Mulher, da Criança de do Adolescente Fernandes Figueira da Fiocruz e a Secretaria de Estado em Saúde do Rio de Janeiro. O presente subprojeto visa somar na realização do Censo visto não existir qualquer mapeamento sobre o perfil das pessoas atendidas nos diferentes equipamentos da Rede de Atenção Psicossocial (RAPS) do Estado do Rio de Janeiro e nem oferta de qualificação que debata sobre os marcadores da diferença, em destaque, a partir da ferramenta da interseccionalidade. Tais ausências impactam diretamente nos atendimentos ofertados para os usuários.

Bolsista: JULIANE LEAL JUNQUEIRA PINHEIRO
Orientador(a): André Felipe Candido da Silva
Resumo: As atividades de pesquisa se iniciaram há apenas um mês, de maneira que foi possível apenas iniciar a familiarização com os debates teóricos relativos ao projeto e às áreas do conhecimento em que ele se insere. Desse ponto de vista, destacam-se as leituras sobre as bases da história ambiental e sobre a história das ciências, dois campos que se entrecruzam na análise da história dos estudos sobre a biodiversidade amazônica realizados no contexto do Projeto Dinâmica Biológica de Fragmentos Florestais (PDBFF), uma parceria entre o World Wildlife Fund (WWF) e o Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia (INPA), que depois de 1991 passou a envolver, ao invés do WWF, o Instituto Smithsonian. Foi possível nesse curto período conhecer o contexto de elaboração desse projeto, os principais personagens que participaram dele e como as discussões e estudos sobre biodiversidade se entrelaçaram com a preocupação com a conservação da Amazônia, em um período que ações estimuladas pelo ideal de desenvolvimento provocavam devastação ecológica sem precedentes na região. Feito esse reconhecimento inicial do contexto teórico e geral em que o projeto se insere, a finalidade da pesquisa é buscar fontes documentais que se encontram sob a guarda do Arquivo Nacional. Essa pesquisa visa complementar outros conjuntos documentais que já foram coletados em acervos do Brasil e do exterior sobre o projeto de interesse, o PDBFF.

Bolsista: ISABELLE DA SILVA OLIVEIRA SANTOS
Orientador(a): FERNANDA MARCICANO BURLANDY
Resumo: Segundo dados da Organização Mundial da Saúde (OMS), as doenças diarreicas são responsáveis por cerca de 1.7 bilhão de casos e causam, anualmente, cerca de 525.000 mortes de crianças com menos de cinco anos, sendo a segunda principal causa de mortalidade na população infantil. Diversos estudos demonstram que os rotavírus A (RVA) são os principais agentes virais associados a Doença Diarréica Aguda (DDA) seguidos pelos norovírus e os mastadenovirus (HAdV). Após a introdução da vacina contra os rotavírus em escala global, foi observada uma significativa redução nos casos de DDA associada a esse agente viral em muitos países, inclusive no Brasil. Embora a incidência de gastroenterite aguda seja maior entre crianças pequenas, casos esporádicos e surtos geralmente envolvem pessoas de todas as idades e, dependendo do cenário e da população, até 50% dos casos notificados podem permanecer sem diagnóstico. Nesse contexto surgem evidências crescentes da importância de vírus emergentes tais como os astrovirus na etiologia mundial da DDA. Portanto, faz-se importante ampliar a investigação laboratorial da DDA associada a outros patógenos virais. Neste contexto, o projeto propõe, a partir das amostras clínicas oriundas de casos de gastroenterites agudas recebidas no Laboratório de Referência Regional de Rotaviroses, para a vigilância das diarréias agudas, e com resultado negativo para RVA e norovirus, determinar a ocorrência de vírus gastroentéricos emergentes tais como astrovirus no Brasil entre os anos de 2023 e 2024. Para tal 607 amostras de fezes selecionadas com resultado negativo prévio, provenientes de 11 estados do Brasil que figuram dentro da abrangência do LRRR, foram processadas e preparadas suspensões fecais a 10% em tampão Tris-HCl Ca2+ 0,01M pH 7,2. O material genético viral foi purificado e concentrado utilizando o kit QIAamp Viral Mini Kit e o extrator QIAcube(Marca Registrada) . A detecção e quantificação viral foi realizada utilizando-se o ensaio RT-qPCR no sistema 7500 Real Time PCR System(Marca Registrada) (Applied Biosystems, USA) tendo como alvo regiões específicas dos astrovírus, de acordo com protocolos descritos previamente e validados no laboratório. A caracterização molecular foi realizada através da amplificação da região parcial ORF2 (gene do capsídeo), os amplicons resultantes purificados com o kit QIAquick PCR Purificação (QIAGEN) e o sequenciamento nucleotídico parcial feito utilizando kit ABI Prism BigDye Terminator v3.1 (Marca Registrada) na Plataforma do Sequenciamento de DNA PDTIS /FIOCRUZ. Foi observada uma taxa de positividade de 11% (67/607) para Astrovirus humanos (HAst) nos anos do estudo. As cargas virais variaram de 1,46 x 104 a 3,00 x 1012 GC/g (mediana de 2,60 x 105GC/g) indicando alta carga viral na maioria das amostras. Em relação aos estados estudados, uma maior taxa de detecção foi observada na região Sul (49,2%) (33/67), seguido da região Nordeste (28,3%) (19/67) e, por fim, da região Sudeste (22,4%) (15/67). O sequenciamento nucleotídico da região parcial ORF2 (gene do capsídeo) foi possível de 24 em um total de 58 amostras analisadas (41,3%). O genótipo predominante durante o período de monitoramento foi o clássico Mamastrovirus 1 (HAstV-1) (16 amostras, 66,6% das sequencias), seguido pelo genótipo Mamastrovirus 2 (HAstV- 2) (4 amostras, 16,6%) e Mamastrovirus 3, 4 e 5 (HAstV-3, HAstV-4, HAstV-5) (1 amostra de cada, 4,2%/genótipo). Em nosso período de análise dos 16 genótipos de HAstV-1 identificados, 5 deles foram provenientes de amostras de surtos de diarréia aguda na região sul do país, sendo todos eles provenientes de indivíduos que não apresentaram registro vacinal para rotavírus. A vigilância laboratorial da DDA procura detectar a presença de rotavírus e norovírus por serem conhecidos globalmente como os principais agentes etiológicos. Portanto, o estudo da participação de outros vírus gastroentéricos emergentes ressalta a importância da vigilância expandida das diarréias agudas.

Bolsista: Julia Aquino Murta
Orientador(a): Cristina Toscano Fonseca
Resumo: Construção de uma proteína quimérica recombinante com epítopos imunoprotetores para uso em formulações vacinais contra a esquistossomose mansônicaJulia Aquino Murta1, Antônio Mauro Rezende2, Patrícia Martins Parreiras3, Poliane Silva Maciel1, Cristina Toscano Fonseca11 Laboratório de Biologia e Imunologia de Doenças Infecciosas e Parasitárias, Fiocruz Minas 2 Laboratório de Biotecnologia Aplicada a Patógenos, Fiocruz Minas3 Fiocruz MinasDevido à ocorrência recorrente de reinfecção por Schistosoma mansoni após a quimioterapia com o Praziquantel em áreas endêmicas para a esquistossomose, medidas mais eficazes para combater a transmissão dessa doença são essenciais. O desenvolvimento de uma vacina terá um grande impacto na redução da transmissão da doença, caso essa seja capaz de promover uma proteção elevada e duradoura. A utilização de ferramentas de bioinformática para a busca de potenciais alvos vacinais permite o desenvolvimento de vacinas quiméricas, que podem induzir respostas imunes mais robustas que as observadas em vacinas de subunidade. Esse projeto tem como objetivo a construção de uma proteína quimérica recombinante, composta por epítopos protetores de proteínas do parasito, para ser usada como antígeno vacinal contra a esquistossomose. Para seleção dos epítopos protetores foi realizada uma busca por artigos científicos usando o termo de entrada immunodominant epitopes for schistosomiasis vaccine. Foram encontrados 172 artigos, dentre os quais somente 5 utilizaram epítopos em ensaios de imunização. A partir disso, foram selecionados 7 epítopos e 4 linkers para a construção da proteína. Foi realizada a construção de 7 proteínas utilizando-se os epítopos e linkers escolhidos. A predição de epítopos de célula B na sequência das proteínas quiméricas foi realizada pelo preditor BepiPred 2.0, utilizando um threshold de 0,6. A predição de epítopos de célula T foi realizada a partir da afinidade desses por moléculas de MHC II utilizando o servidor MHC-II Binding Predictions, considerando-se resultados com o IC50 < ou = 500. Dentre as 7 construções, foram selecionadas as 3 mais promissoras para seguir com as demais análises, denominadas SmQuimera03_6, SmQuimera03_7 e SmQuimera03_12. A cobertura vacinal dessas construções na população brasileira foi averiguada pelo servidor Population Coverage, e as 3 proteínas apresentaram coberturas altas (99,84%, 99,84% e 99,94%, respectivamente). As estruturas terciárias foram preditas e modeladas a partir do servidor AlphaFold2, e os resultados de pLDDT e PAE das estruturas preditas revelaram uma baixa confiabilidade dos modelos obtidos. Nessas estruturas, observamos os epítopos de célula B em formato de looping e folha beta, características desejáveis para manutenção dos epítopos lineares selecionados. As 3 proteínas demonstraram conformações desordenadas. As predições de alergenicidade, toxicidade e antigenicidade foram realizadas pelos servidores AllerTOP v2.1, ToxinPred e VaxiJen 2.0, respectivamente, e as 3 proteínas se apresentaram não alergênicas, não tóxicas e antigênicas. A obtenção da sequência codificadora e a otimização de códons para síntese gênica foram realizadas pela ferramenta Codon Optimization Tool, e os resultados demonstraram que os 3 genes obtidos (smquimera03_6, smquimera03_7 e smquimera03_12) apresentam características e complexidade gênica que permitem sua síntese. A partir dos resultados obtidos, observa-se que, devido à baixa confiabilidade das estruturas terciárias preditas, as 3 proteínas não se apresentam como as mais favoráveis para a expressão e purificação. Como perspectiva para esse projeto, pretendemos realizar uma nova abordagem para a construção das proteínas quiméricas visando a obtenção de modelos estruturais mais confiáveis e de proteínas menos desordenadas.

Bolsista: ANDRE JOAQUIM GONCALVES DE CAMPOS JUNIOR
Orientador(a): Marcus Vinícius Pereira da Silva
Resumo: O subprojeto de pesquisa tem como objetivo desenvolver um banco de dados com o perfil dos membros do grupo Refugiados do Vaticano, identificando suas características políticas, religiosas, profissionais, socioeconômicas e socioetárias, bem como seus itinerários no processo de saída da Europa e chegada ao Brasil, além dos personagens e instituições que os apoiaram. Esse mapeamento servirá, posteriormente, como base para a aplicação do estudo prosopográfico e da análise de redes sociais, conduzido pelo orientador do projeto. O banco de dados inicialmente desenvolvido na plataforma REDCap, disponibilizada pela Vice-Presidência de Pesquisa e Coleções Biológicas da Fundação Oswaldo Cruz (Fiocruz), está sendo migrado para o Tropy. Posteriormente, os dados coletados e produzidos serão disponibilizados de forma aberta no Repositório de Dados de Pesquisa da Fiocruz ArcaDados. O subprojeto articula duas abordagens complementares: uma de cunho tecnológico voltada para o desenvolvimento do banco de dados e a exploração de técnicas de coleta, tratamento, gestão e visualização de dados e outra historiográfica voltada para a análise de fontes primárias e discussão do contexto social europeu e brasileiro nas décadas de 1930 e 1940. Para cumprir seus objetivos, na primeira etapa da pesquisa a bolsista PIBIT realizou uma revisão da literatura recente que aplica a prosopografia e a análise de redes sociais como métodos no campo da História, alinhando-se ao escopo teórico do orientador. Em seguida, foi desenvolvido o banco de dados na plataforma REDCap. Na etapa seguinte, a bolsista selecionou e analisar fontes primárias com o intuito de identificar o perfil dos refugiados grupo composto por apátridas católicos antifascistas e judeus europeus que receberam visto permanente no Brasil, graças à diplomacia entre o Vaticano e o Ministério das Relações Exteriores, durante o governo de Getúlio Vargas. Para tanto, o subprojeto também está explorando técnicas de inteligência artificial voltadas à transcrição de manuscritos.