Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição 3

Bolsista: VITORIA PLISKIEVISKI DALLAZUANA
Orientador(a): Pryscilla Fanini Wowk
Resumo: O Bacilo de Calmette-Guérin (BCG) é uma vacina atenuada, utilizada para prevenir casos graves de tuberculose. Estudos realizados relatam que a vacinação com BCG contribui com a redução da mortalidade infantil, fato subsidiado pela proteção oferecida pelo bacilo contra agentes infecciosos não relacionados. Em outros trabalhos, foi constatada uma redução da incidência do vírus sincicial respiratório, além de uma diminuição de infecções do trato respiratório em indivíduos vacinados. Esses dados podem ser explicados pela reprogramação epigenética induzida pela BCG, nas células de imunidade inata, acarretando uma resposta imune intensa frente à estímulos secundários, fenômeno chamado de imunidade treinada. Há indícios que a atividade moduladora da BCG possa contribuir para retardar efeitos celulares de imunossenescência, além disso, a vacina vem sendo utilizada para o tratamento do câncer de bexiga e outros tumores malignos. Os mecanismos moleculares que suportam esse fenômeno ainda não estão claros. Para aprofundarmos os estudos nesta área é essencial a padronização da curva de crescimento de BCG em meio líquido, determinar a concentração bacteriana por mensuração da densidade óptica (DO) de cultura bacteriana e interpolação com os dados de titulação (unidades formadoras de colônia UFC) da mesma. Além disso, os estoques bacterianos produzidos precisam ser testados quando a sua eficiência em infectar e ativar células da resposta imune. Desta forma, foi realizada a determinação da curva de crescimento de BCG pela relação entre densidade óptica de cultura bacteriana em meio líquido e a quantificação das UFCs realizadas por meio de titulação em meio sólido. A padronização dos protocolos de cultivo de BCG foi eficiente, com a obtenção de estoques em títulos na ordem de -106-10. Além disso, no cultivo em meio líquido 7H9 suplementado com ADC, verificou-se que a D.O. foi atingida de forma rápida e estável, mantendo-se consistentemente próxima ao valor ideal de 0,8, recomendado para garantir a viabilidade da cultura. Em contraste, o cultivo realizado em meio suplementado com OADC apresentou crescimento mais lento e picos elevados de absorbância, o que comprometeu a viabilidade do bacilo. Por fim, camundongos C57BL/6 foram imunizados com BCG e as células da medula óssea foram utilizadas para a diferenciação de macrófagos in vitro. A imunização prévia não interferiu na taxa de diferenciação dos macrófagos quando comparado a animais imunizados com PBS.

Bolsista: MARIA MUNIZ ABRAHAO
Orientador(a): Fernanda Heloise Cortes
Resumo: Após a infecção pelo SARS-CoV-2, algumas pessoas desenvolvem sintomas pós-COVID, conhecidos como síndrome pós-COVID aguda (PACS) ou sequela pós-aguda da COVID-19 (PASC). A frequência desses sintomas varia entre diferentes estudos. As sequelas mais comuns incluem dificuldade de concentração, problemas respiratórios, distúrbios de ansiedade, fadiga e sintomas dermatológicos e digestivos. A desregulação da resposta imune tem sido apontada como um fator-chave na patogênese da PASC. Esse fenômeno afeta tanto células da imunidade inata quanto da imunidade adaptativa. Estudos têm apresentado resultados divergentes em relação às células Treg na PASC, com algumas evidências sugerindo uma resposta protetora e outras indicando uma resposta inflamatória exacerbada. É provável que alterações nas células Treg contribuam para a patogênese da PASC. O objetivo deste estudo é avaliar se há alteração na frequência de células Treg e Th17, bem como em seus perfis funcionais, em indivíduos com PASC comparados a indivíduos sem PASC. Serão isoladas células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de indivíduos com e sem PASC. As amostras serão marcadas com um painel de anticorpos monoclonais para identificação de células Th17 e Treg e de seus perfis funcionais, após estímulo com PMA e ionomicina. As amostras serão analisadas por citometria de fluxo. Este estudo faz parte de uma pesquisa maior conduzida no Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas (INI)/Fiocruz, na qual já foram identificados 964 indivíduos com PASC, dos quais 696 amostras foram recebidas no Labaids. As amostras para o estudo atual foram selecionadas usando como critérios iniciais o número de tubos disponíveis, idade inferior a 65 anos e diagnóstico de COVID-19 até 18 meses antes. Após a primeira seleção, foram identificados 99 voluntários, sendo os sintomas neurológicos e mentais os mais frequentes. Dessa forma, selecionamos como filtro adicional a presença de dois sintomas neurológicos e um mental. Além disso, voluntários com tuberculose ativa ou HIV foram excluídos. Entre os 46 voluntários selecionados, os sintomas mais prevalentes foram esquecimento (97,8%) e dificuldade de se concentrar (87%). Os anticorpos que serão usados no painel para identificar as células Treg e Th17 estão sendo titulados. Os dados obtidos neste estudo irão contribuir para uma melhor compreensão do papel das células Treg na PASC.

Bolsista: ANDRE LUIS FELIX DA SILVA TERRES
Orientador(a): DEYSE CHRISTINA VALLIM DA SILVA
Resumo: Listeria monocytogenes é um bacilo Gram-positivo, anaeróbio facultativo e não formador de esporos causador da Listeriose, doença de transmissão hídrica e alimentar. A Listeriose causa sintomas similares à gripe e diarreia, mas em indivíduos imunossuprimidos pode evoluir para a forma invasiva da doença, causando septicemia e meningite, além de causar aborto em grávidas. A principal forma de transmissão é o consumo de alimentos prontos para consumo contaminados, como queijos e saladas. L. monocytogenes apresenta uma série de características que dificultam sua remoção dos ambientes de processamento de alimentos como resistência à baixas temperaturas, alta salinidade, metais pesados e sanitizantes, além de produzir biofilme. Este estudo teve como objetivo avaliar a produção de biofilme e o perfil de resistência à antimicrobianos (ampicilina, eritromicina, meropenem, penicilina e sulfametoxazol-trimetoprima), aos metais pesados arsênio e cádmio e ao sanitizante cloreto de benzalcônio, em 140 cepas de L. monocytogenes depositadas na Coleção de Listeria do Instituto Oswaldo Cruz da Fundação Oswaldo Cruz (IOC/Fiocruz). Até o momento, todas as cepas já foram identificadas fenotipicamente e molecularmente. Das cepas selecionadas, 100 cepas foram analisadas quanto a resistência e produção de biofilme, onde 78 (78,0%) cepas resistentes à cadmio, 29 (29,0%) à arsênio, 10 (10,0%) à cloreto de benzalcônio e todas sensíveis aos antimicrobianos testados. Apenas 6% das amostras tiveram ausência de produção de biofilme, enquanto 53% apresentaram fraca formação, 40% moderada e 1% forte. Os resultados deste estudo apontam para a presença de cepas de L. monocytogenes capazes de persistir em ambientes de processamento de alimentos, representando um risco para a indústria de alimentos e consumidores, especialmente para pessoas imunossuprimidas e gestantes.

Bolsista: MARIA HELENA NOGUEIRA DA SILVA
Orientador(a): MARLY MARQUES DA CRUZ
Resumo: Este relatório parcial de pesquisa apresenta o mapeamento de materiais que abordam a equidade para segmentos populacionais vulnerabilizados no Sistema Único de Saúde (SUS). O projeto, vinculado à pesquisa sobre a implantação da Vigilância Alimentar e Nutricional (VAN) na Atenção Primária à Saúde (APS), busca desenvolver estratégias de formação e usos relativos ao Monitoramento e Avaliação para subsidiar a gestão da atenção nutricional nesses grupos.A pesquisa justifica-se pela persistência de desigualdades no acesso à saúde para populações como negros, quilombolas, indígenas e LGBTQIA+, entre outros. O mapeamento de materiais/políticas que abordem a equidade no SUS, focalizando nove segmentos populacionais específicos, visa identificar fatores que aprofundam as iniquidades na saúde e estimular a reflexão sobre a temática, buscando alternativas que garantam estratégias de alimentação e nutrição mais justas e inclusivas.Os objetivos do projeto incluem mapear materiais/políticas sobre equidade no SUS, sistematizar os materiais encontrados, reconhecer os fatores que aprofundam as iniquidades em saúde e identificar estratégias de enfrentamento. A metodologia envolveu buscas em seis bases de dados (BVS, PubMed, SCIELO, Periódicos Capes, Scopus e Web of Science) no período de janeiro a março de 2025, utilizando descritores como "equidade em saúde" combinados com termos relacionados a políticas e programas de nutrição e alimentação.A revisão bibliográfica foi concluída, permitindo a identificação e sistematização de um conjunto relevante de publicações. As análises parciais dos dados foram iniciadas, e o relatório documenta o progresso alcançado, direcionando as próximas etapas da pesquisa. Os resultados preliminares indicam a necessidade de aprofundar a análise dos materiais identificados para subsidiar o desenvolvimento de estratégias de formação e usos relativos ao Monitoramento e Avaliação na APS para os grupos mais vulnerabilizados.As perspectivas futuras incluem uma análise qualitativa aprofundada dos materiais mapeados, estudos de caso de políticas e programas que se destacam pela incorporação da perspectiva da equidade, e a elaboração de materiais educativos para profissionais de saúde. A triagem final das bases de dados e a análise dos artigos selecionados serão realizadas, e as informações serão sintetizadas para identificar as principais contribuições da pesquisa para o campo de estudo.

Bolsista: MYLLENA PAULA DE MELO VASCONCELOS
Orientador(a): MICHELLE CHRISTIANE DA SILVA RABELLO
Resumo: O estudo tem como objetivo avaliar a eficácia de biomarcadores sanguíneos no diagnóstico precoce da hanseníase em pacientes e seus contatos domiciliares. Os marcadores como IgM anti-PGL-1, IP-10, IL-1Beta, PCR, VDR, ApoA1 e S100A12 serão analisados no soro de pacientes com diferentes formas clínicas da doença e dos seus contatos. Até o momento, 212 indivíduos suspeitos com a doença e 67 contatos foram recrutados, dos quais foram coletados de dados clínicos, epidemiológicos e amostras biológicas para análises laboratoriais. Resultados preliminares mostram maior positividade do teste rápido Bioclin Fast ML Flow Hanseníase em pacientes multibacilares, porém este teste apresentou baixa sensibilidade para triagem de contatos, evidenciando a necessidade do uso de ELISA para quantificação de IgM anti-PGL-1. Os níveis de IL-1Beta e IP-10 apresentaram diferenças estatisticamente significativas entre os grupos, sugerindo potencial uso como indicadores de progressão da doença. A continuidade do estudo, com aumento do número amostral e análise de outros biomarcadores, é fundamental para validar esses achados.

Bolsista: NICOLE DE MENEZES MACEDO
Orientador(a): LUIZ ANASTACIO ALVES
Resumo: O P2X7 é um receptor de membrana encontrado em diversas células em mamíferos, sendo expresso principalmente no sistema imune e na glia. Quando ativado pelo ATP extracelular, o seu ligante fisiológico, ele promove uma série de respostas pró-inflamatórias, incluindo a liberação de citocinas, a produção de espécies reativas de oxigênio e a morte celular. Estudos pré-clínicos com antagonistas do P2X7 mostraram efeitos promissores na redução da inflamação e da dor em animais. No entanto, o P2X7 ainda não possui antagonistas aprovados para uso clínico, o que estimula a pesquisa e o desenvolvimento de novas moléculas contendo essa atividade. Neste cenário, o screening virtual é uma estratégia promissora para a descoberta de novos antagonistas para o P2X7, permitindo o rápido teste de bibliotecas virtuais para selecionar moléculas com alta afinidade pelo receptor para a condução de testes in vitro. O objetivo desse projeto é realizar o screening virtual para identificar moléculas com potencial atividade antagonista sobre o receptor P2X7. Para isso, analisamos a interação de mais de 60 mil moléculas sobre os sítios ortostérico e alostérico do P2X7 através da técnica de docking molecular utilizando os programas DockThor e AutoDock Vina. Dentre as moléculas analisadas encontram-se algumas oriundas de produtos naturais, que apresentaram valores de score na faixa de -13.341 a 17 kcal/mol, bem como um grupo de moléculas de reposicionamento de fármacos, cujos scores variaram entre -13.302 a -5.606 kcal/mol. Além disso, elaboramos rankings contendo as moléculas que apresentaram os menores valores de score, os quais indicam maior afinidade pela proteína do P2X7. Os dados sugerem que as moléculas situadas nos rankings (top-100 e top-25) apresentam maior afinidade pelo P2X7 em comparação aos ligantes de referência, como o ATP, cujo valor de score foi de -7.6 e -8.2 kcal/mol para os sítios ortostérico e alostérico do P2X7, respectivamente. A nossa perspectiva no momento é finalizar os testes de docking molecular e selecionar moléculas candidatas para avançar para a etapa de predições in silico acerca das propriedades farmacocinéticas e o espectro de atividades biológicas, bem como para a etapa de testes in vitro. Com isso, acreditamos que os dados podem contribuir significativamente para a farmacologia dos receptores purinérgicos.