Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição 3

Bolsista: LUCAS BARRETO DOS SANTOS
Orientador(a): DEBORAH BITTENCOURT MOTHE
Resumo: A leishmaniose visceral (LV) é uma doença causada por protozoários transmitidos por fêmeas de flebotomíneos, que atinge humanos e animais, em que seu agente etiológico tem o cão como principal reservatório urbano. A Leishmaniose Visceral Humana (LVH) é uma doença tropical negligenciada que pode ser fatal em casos tratados inadequadamente ou não tratados. Por isso, o diagnóstico deve ser feito de forma precisa e precoce. No entanto, existem falhas no atual protocolo de diagnóstico da LVH, levando a uma baixa sensibilidade e especificidade, e possibilidade de reações cruzadas. Estudos mostram que a utilização de proteínas recombinantes é uma possibilidade promissora para o diagnóstico sorológico da leishmaniose visceral humana. Objetivo: Avaliar os epítopos mais imunogénicos de proteínas recombinantes, e selecionar os mais promissores para analisar o desempenho na detecção de soropositividade de pacientes infectados por L. infantum. Métodos: Esse projeto foi submetido ao CEP, e todas as amostras sorológicas de cães foram obtidas de acordo com os procedimentos estabelecidos pelo CEUA (protocolo 03/2013) da UFBA e do IGM (protocolo 015/2009). Duas das proteínas da biblioteca de cDNA que apresentaram os melhores parâmetros de sensibilidade e especificidade passaram por uma avaliação in silico, a rLci2 e a rLci5. O BLAST-p foi utilizado para investigar a similaridade genética com outros patogenos presentes em coinfecções com LV. Foram produzidas matrizes de similaridade da sequência das proteínas e avaliada a identidade no programa Clustal Omega. Para normalização dos resultados de ELISA das diversas placas, foi calculado o índice de reatividade (IR), e os resultados foram processados com auxílio do GraphPad Prism. Para padronizar o ELISA indireto, foram consideradas distintas concentrações de antígenos, anticorpo primário (ac1) e secundário (ac2) para identificação dos melhores parâmetros capazes de diferenciar com maior acurácia pacientes positivos e negativos para LVH. O ELISA indireto desenvolvido com a Lci5 foi também testado utilizando a proteína A substituindo anticorpo secundário, com o intuito de otimizar a capacidade diagnóstica. Os ELISAs indiretos seguiram protocolo previamente padronizado com reagentes para adaptação de um kit comercial. Curvas ROC foram usadas para avaliar sensibilidade e especificidade, com intervalo de confiança (IC) de 95%. Para a avaliação da reatividade cruzada, o ELISA indireto previamente sensibilizado com a proteína rLci5 foi testado frente a um painel sorológico contendo amostras sabidamente positivas para LVH, sabidamente negativas, e soros infectados com outras doenças. Resultados: o ELISA foi padronizado com rLci5 em 0,50microg/mL e a rLci2 a 0,60microg/mL, ac1 diluído em 1:50 e ac2 em 1:40000. A padronização com a proteína A adotou as mesmas concentrações de anticorpo primário e antígeno, e a diluição da proteína A ficou em 1:20000. A curva ROC das concentrações definidas demonstrou especificidade de 100% e sensibilidade de 100%. Na análise do grupo composto por painel de amostras positivas para LVH e soros de pacientes saudáveis, a avaliação estatística revelou uma sensibilidade de 91,5% e especificidade de 61,1%. Ao analisar o subgrupo composto por amostras positivas para LVH e LT, observou-se sensibilidade de 91,5% e especificidade de 90,4%. Os resultados obtidos com o subgrupo de amostras positivas para LVH e Doença de Chagas, revelaram uma sensibilidade de 91,5% e especificidade de 90%. Conclusões: O presente estudo evidenciou que a proteína recombinante rLci5 apresentou potencial para ser usada no sorodiagnóstico de LVH, e a otimização do ELISA indireto com rLci5 com a proteína A mostrou desempenho superior ao protocolo anterior. Ao avaliar a reatividade cruzada diante de amostras caracterizadas com outras infecções, os resultados demonstraram uma reatividade cruzada moderada com Leishmaniose Tegumentar e alta reatividade cruzada com Doença de Chagas.

Bolsista: DEBORA RIBEIRO REZENDE
Orientador(a): Flávia Tavares Silva Elias
Resumo: A insegurança alimentar e nutricional é uma condição que atravessa a realidade social contemporânea, em especial em comunidades rurais, emergindo como uma questão altamente prioritária no campo da saúde pública. Em resposta a essa realidade, sistemas alternativos de produção de alimento têm ganhado força, entre eles a produção familiar agroecológica feminina, baseada na sustentabilidade social, ecológica, e econômica, e promoção de segurança alimentar. Objetivo: Identificar estratégias e obstáculos da promoção da produção familiar agroecológica feminina e seu impacto na segurança alimentar e nutricional de comunidades rurais. Métodos: Escrita e publicação de protocolo de pesquisa na plataforma de ciência aberta Open Science Framework [DOI 10.17605/OSF.IO/K3B9Z]; registro no Comitê de Ética em Pesquisa [Certificado de Apresentação de Apreciação Ética CAAE: 74423523.0.0000.8027]; busca em 11 bases de dados eletrônicas de saúde e agricultura; seleção de estudos e extração de dados; escrita de síntese de evidências narrativa/descritiva; realização de diálogo deliberativo com partes interessadas. Resultado: Foi identificado um total de 787 referências, sendo 21 os estudos finais incluídos na síntese. Os estudos relataram 22 estratégias, categorizadas a partir dos âmbitos de implementação Governamental, para as executadas por instituições governamentais; Comunitário, para as originadas e engajadas pela comunidade local; e Individual, aquela originária de uma experiência singular sem o enfoque comunitário. Os obstáculos identificados abrangeram dez categorias: 1) Estrutura econômica e financiamento, 2) Carga de trabalho feminina, 3) Massificação da modernização agrícola, 4) Ideologia do agronegócio, 5) Êxodo rural, 6) Violência de gênero, 7) Direito à propriedade, 8) Conhecimento nutricional, 9) Isolamento social feminino, e 10) Instabilidade do mercado. Conclusão: A presença feminina nos processos de obtenção de alimento, planejamento da produção e preparo de refeições contribui para a disponibilidade, acesso, utilização e estabilidade alimentar. Caminhos devem ser construídos para garantir o pleno acesso da mulher aos recursos necessários para que possam se dedicar à prática agrícola, e para que essa prática seja reconhecida e valorizada.

Bolsista: ALICE DA SILVA RODRIGUES SACRAMENTO
Orientador(a): JUAN CLINTON LLERENA JUNIOR
Resumo: A aluna está em fase final da sua graduação em Medicina; tendo iniciado o programa PIBIT com menos de 12 meses atrás. Portanto, em tempo habil, conseguiu fazer a anãlise inicial dos dados propostos no projeto pela incoproração de uma nova medicação no SUS para pacientes com osteogênese Imperfeita. Há espaços a serem ainda explorados; contudo, organizou o banco de dados no sentido de preparar o material para as análises necessárias visando identificar marcadores de eficácia do medicamento.

Bolsista: LETICIA MARIA DA SILVA MARQUES
Orientador(a): JESSICA PEREIRA DOS SANTOS
Resumo: No Piauí, embora estudos anteriores tenham relatado diminuição na prevalência da doença de Chagas nas últimas décadas, dados epidemiológicos atuais têm revelados altas taxas de soroprevalência em diversos municípios e com indicação de transmissão vetorial ativa. Nessa conjuntura, a participação da comunidade na notificação de triatomíneos é de fundamental importância para a manutenção do controle de vetores domiciliares. Entretanto, para isto, torna-se necessário que os processos educacionais relacionados à saúde sejam considerados. O estudo tem como objetivo realizar ações de educação em saúde em localidades rurais endêmicas para a doença de Chagas. Para isto, foram desenvolvidos jogos com foco na doença de Chagas denominados de MemoChagas, Chagasnó, Caça-Chagas, Bingo-Chagas, Trilhando a erradicação da doença e Quebra-cabeça. Os materiais foram baseados nos clássicos jogos de memória, dominó, quebra-cabeça, caça-palavras e jogo de trilha, considerando o contexto da temática. A fase de produção foi desenvolvida numa plataforma de design gráfico denominada Canva, no qual utilizou-se uma apresentação visual rica e atrativa, com fontes e cores dinâmicas, além de ilustrações, palavras-chaves e informações que representam diferentes contextos relacionados com a doença. As imagens escolhidas para compor os jogos foram encontradas em bancos de figuras gratuitos e relacionavam-se ao agente etiológico, vetor, transmissão, sintomas, diagnóstico, prevenção e vigilância da doença. Ademais, foi elaborado um material informativo do tipo folder relacionado com a doença para ser distribuído. A avaliação do conhecimento sobre a doença de Chagas e seus vetores com moradores residentes em localidades rurais no município de Arraial é uma etapa que está em andamento. A informação, educação e comunicação é considerado pelo TG6-IEC Chagas da OMS como estratégico, essencial e complementar para comunicar e compartilhar ferramentas relacionadas à doença, reforçando que essa enfermidade é complexa e envolve não só questões de saúde pública, mas questões ligadas à educação, informação e comunicação em saúde.Palavras-chave: Doença de Chagas. Educação em saúde. Ludicidade. Vigilância.

Bolsista: MARCELLA MIRANDA MARTINS DOS SANTOS
Orientador(a): NATIELE CARLA DA SILVA FERREIRA
Resumo: A disfunção hepática representa um grave problema de saúde pública, e sua progressão para uma condição conhecida como cirrose está associada a um prognóstico desfavorável. Em casos avançados, o transplante de fígado torna-se a única alternativa viável para garantir a sobrevivência do paciente. Contudo, o sucesso do procedimento depende do uso de imunossupressores, especialmente a classe dos inibidores de calcineurina, que apresentam reconhecida eficácia. Apesar disso, esses fármacos apresentam alguns efeitos adversos, como a nefrotoxicidade e o desenvolvimento de diabetes, os quais comprometem a qualidade de vida dos pacientes transplantados. Nesse contexto, o uso de metodologias de screening virtual pode contribuir significativamente para a busca de novos inibidores de calcineurina com maior eficácia e segurança. Entre essas abordagens, destaca-se a técnica de docking molecular, que permite analisar a interação e a afinidade de milhares de moléculas em relação a um alvo biológico. Assim, este projeto tem como objetivo realizar um screening virtual através de docking molecular utilizando moléculas disponíveis em bancos de dados virtuais para identificar potenciais inibidores de calcineurina. A estrutura 3D da calcineurina humana foi adquirida através do banco de dados PDB (ID: 4OR9), sendo posteriormente preparada através do programa Maestro. Os ensaios de docking molecular foram conduzidos através do programa AutoDock Vina, visando identificar moléculas com afinidade pela calcineurina. Os testes foram conduzidos no domínio LxVP da calcineurina, o qual possui interesse farmacológico, pois interage com o fator nuclear de células T ativadas (NFAT) e está envolvido com a ativação dessas células, sendo que, o bloqueio dessa interação resulta na imunossupressão. Até o momento, realizamos o teste de 4.500 moléculas, cujos valores de score obtidos nos ensaios de docking molecular variaram entre -9.260 e -3.008 kcal/mol. Em seguida, selecionamos os 100 fármacos com maior afinidade pelos domínios da calcineurina (top-100) e observamos que os valores de score variaram entre variaram de -9.260 e -7.720 kcal/mol, sendo que alguns desses valores superaram o score do tacrolimo (-6.909 kcal/mol), um imunossupressor usado na terapia clínica e que se liga nesse sítio. Os próximos passos consistem no avanço dos ensaios de docking molecular no programa AutoDock Vina utilizando as moléculas de origem natural que ainda não foram testadas e a seleção de moléculas candidatas para serem testadas in vitro para efeito de validação dos resultados. Com isso, esperamos que os resultados apontem para potenciais inibidores da calcineurina que possam ser utilizados como imunossupressores.

Bolsista: JULIA DUTRA VAZ
Orientador(a): Arthur Daniel Rocha Alves
Resumo: O Parvovírus B19 (B19V) tem um genoma DNA fita simples, com 5596 nucleotídeos, e está associado à uma ampla gama de manifestações clínicas, como: eritema infeccioso, hidropsia fetal, anemia severa ou crise aplástica transitória. Embora tenha um genoma altamente conservado, em mais de 80% entre os isolados, o B19V apresenta três genótipos (1, 2 e 3) que pode ser acessado, via sequenciamento em amostras clínicas, levando a um rastreamento epidemiológico mais preciso. A variabilidade genética de B19V encontrada em um estudo piloto demonstrou a ocorrência de quasispecies na população de estudo avaliada. Em gestantes, mesmo imunocompetentes, a infecção pelo B19V pode resultar em hidropsia e óbito fetal, consequentes de anemia grave. Desta forma, o objetivo do estudo é determinar a variabilidade genética de achados de B19V em gestantes com intuito de correlacionar aos diferentes desfechos dessa infecção. Assim, foram amplificadas as sequências do DNA viral (genoma completo) e aplicada a metodologia de sequenciamento de nova geração (NGS) conforme a plataforma Ion (TermoFisher). Para tanto, foram testadas por métodos sorológicos e moleculares 66 amostras de soro de gestantes atendidas no Instituto Nacional de Infectologia (INI-Fiocruz) entre dezembro/2015 e agosto/2019, com sinais e sintomas sugestivos, porém negativos, de infecção por arboviroses (Dengue, Zika e Chikungunya) e amostras de soro (n=151) de gestantes com suspeita de infecção congênita, coletadas em 2024 (IFF). A infecção por B19V foi avaliada através da detecção de anticorpos anti-B19V IgM e IgG, por ELISA; e através da detecção e quantificação da carga viral por semi-nested PCR e qPCR. Foi realizado o sequenciamento nucleotídico para caracterizar os genótipos virais. A infecção por B19V foi detectada em 27 gestantes com suspeita de arboviroses, sendo 14 com infecção aguda e 13 com infecção persistente, indicando uma incidência de 21,2% e uma prevalência de 74,2%. Já entre as gestantes com suspeita de infecção congênita, 11 apresentavam infecção por B19V, sendo 8 com infecção aguda e 3 persistentes, indicando uma uma incidência de 5,2% e prevalência de 60,9%. Todas as amostras sequenciadas pertenciam ao genótipo 1a. Entre as gestantes com suspeita de arboviroses, foi observada uma chance de aborto 4 vezes maior naquelas infectadas com B19V, comparadas as não-infectadas (OR=4,66 95%CI 1,05-20,66; p=0.004). Já com relação ao NGS, este foi realizado, porém a análise dos resultados ainda está sendo feita pela equipe de bioinformática do projeto. Com a ausência de medidas profiláticas e de tratamento específico, os resultados deste trabalho destacam a importância de realizar o diagnóstico diferencial num contexto de tríplice epidemia viral por arboviroses e de incluir o diagnóstico no exame pré-natal de gestantes que apresentem sinais clínicos e achados sugestivos, como forma de permitir manejo adequado e implementação de estratégias terapêuticas, evitando a evolução para um desfecho negativo.