Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição 3

Bolsista: LUCIELY LINS PALLOT RANQUINE
Orientador(a): MARINETE AMORIM
Resumo: INVENTÁRIO DOS ESPÉCIMES TIPO DE ACARI (MESOSTIGMATA, SARCOPTIFORMES, TROMBIDIFORMES) PARA ELABORAÇÃO DE CATÁLOGO DO ACERVO DA COLEÇÃO DE ARTRÓPODES VETORES ÁPTEROS DE IMPORTÂNCIA EM SAÚDE DAS COMUNIDADES (CAVAISC) DA FUNDAÇÃO OSWALDO CRUZ.O acervo da Coleção de Artrópodes Vetores Ápteros de Importância em Saúde das Comunidades (CAVAISC) consta de aproximadamente, 19.903 lotes com cerca de 82.210 espécimes, 85% das amostras oriundas do Brasil, distribuídas pelos diferentes estados, e 55% na região Sudeste. Há espécimes provenientes dos Estados Unidos, Guiana Francesa, Venezuela, Argentina e Peru; de países africanos, europeus e asiáticos; além do continente antártico. A CAVAISC é composta de duas classes distintas de artrópodes: Arachnida e Insecta, subdivididos por seções: Histórica Henrique Aragão (HIS); Ixodológica (IXO); Acarológica (ACA); Phthiraptera (PHT); Siphonaptera (SIPHO) e Arachnida (ARAC). E não possui catálogo de espécie tipo, o que justifica o projeto, cujo objetivo é realizar inventário dos espécimes tipo da seção Acarológica das ordens Mesostigmata, Sarcoptiformes e Trombidiformes para elaboração de catálogo de espécies tipo depositado na CAVAISC da FIOCRUZ. Para realização do trabalho foi utilizado a pesquisa Bibliográfica através de PubMed, Periódicos CAPES/MEC, Google Acadêmico e Biblioteca de Manguinhos da série Tipo depositados na CAVAISC. Utilizando palavras chaves pertinentes ao estudo. Os exemplares tipo detectados nos Bancos de Dados da CAVAISC foram rastreados no acervo da Coleção e as informações disponíveis foram plotadas em planilha digital do programa Excel. Os dados dos exemplares tipo obtidos na bibliografia, nos bancos de dados da CAVAISC e no acervo da Coleção foram relacionados. Possibilitando verificar quantos espécimes da série tipo da Seção Acarológica estão presentes na CAVAISC. Foi analisado também o estado de preservação dos espécimes, depositados e não correlacionados no acervo como tipo, mas na bibliografia constam como tipo, e espécimes determinados como tipo na bibliografia, mas não localizados na Coleção. Assim, os dados obtidos possibilitaram o inventário de espécimes tipo de Acari das ordens Mesostigmata, Sarcoptiformes e Trombidiformes. Existem 12 espécies tipo dentro das ordens pertencentes a subclasse Acari depositadas na Seção Acarológica (ACA) da CAVAISC, uma da ordem Mesostigmata (Cameronieta alamensis), sete são da Ordem Sarcoptiformes (Dolichodectes neotropicus, Pterodectes amaurochalinus, Atrichophyllodes delalandi, Anisophyllodes candango, Platyacarus sittasomi, Tyranniphyllodes pitangi e Cotingodectes breviphallus) e quatro da Ordem Trombidiformes (Caamembecaia gratiosus, Parasecia fernandae, Geckobia andina e Geckobia circumdata). A Seção Acarológica possui depósito de sete holótipos, um alótipo e 48 parátipos, contribuindo para elaboração do Catálogo de espécies tipo da Seção Acarológica da CAVAISC.Palavras-chave: Ácaros, Seção Acarológica, Catálogo, CAVAISC

Bolsista: Ana Clara De Oliveira Mota
Orientador(a): ANDREZA PAIN MARCELINO
Resumo: As leishmanioses são um conjunto de doenças causadas por diferentes espécies de protozoários do gênero Leishmania, sendo uma antropozoonose de grande importância em saúde pública. O Ensaio Imunoenzimático - ELISA é um dos métodos imunológicos mais utilizados para detectar a presença de antígenos ou anticorpos, apresenta boa sensibilidade e especificidade, é de fácil execução e permitem a utilização de uma variedade de antígenos, tais como, brutos, purificados e recombinantes. O diagnóstico da LTA deve ser oportuno, acessível, de baixo custo e acurácia adequada, e os métodos diagnósticos disponíveis atualmente são pouco sensíveis ou exigem profissionais especializados para a realização do exame ou coleta do material biológico. Neste contexto, propomos o desenvolvimento e validação de dois protótipos com princípios antigênicos distintos do complexo L. (V.) braziliensis para a produção de kits diagnósticos. O objetivo geral do estudo é avaliar dois protótipos de kits para o diagnóstico sorológico da leishmaniose tegumentar americana, pelo método de ELISA. Os objetivos específicos são determinar os parâmetros de desempenho dos protótipos e avaliar o custo-efetividade dos protótipos. Para a produção dos protótipos foram utilizadas as soluções já padronizadas por Bio-Manguinhos para o kit EIE-LVC(Marca Registrada) . Todas as soluções utilizadas neste estudo têm suas formulações protegidas por segredo industrial, por serem utilizadas em kits comercializados por Bio-Manguinhos/FIOCRUZ. Para padronização dos protótipos Bio-Manguinhos utilizou 75 amostras de casos confirmados para LTA por testes parasitológicos e 103 amostras de plasma/soro de controles negativos, sendo 67 amostras provenientes de doadores de sangue do HEMORIO e 46 amostras de soro negativas de indivíduos saudáveis do INI. A determinação de cut-off e faixa cinza. Para avaliação dos protótipos, as amostras clínicas selecionadas para o estudo foram cegadas. A amostra armazenada (matriz) foi identificada pelos seus laboratórios de origem por um número único, que garante a proteção das informações dos participantes e permite a localização rápida e segura das alíquotas. As matrizes foram retiradas do freezer a -20°C, colocadas em refrigeração à temperatura de 2 a 8°C e após o descongelamento total, foram criadas alíquotas de 100 microL de cada matriz, que em seguida foram transferidas para microtubos (microtubo A) de 0,5 mL. A abertura ou quebra do cegamento foi realizada com a presença do coordenador do estudo, pesquisador principal e responsável pelo cegamento após a realização de todos os testes de validação e a inclusão dos resultados no sistema REDCap. Na análise econômica, os CUSTOS INDIRETOS relacionados a capacidade instalada da instituição produtora do "protótipo ELISA para LTA" (Bio-Manguinhos) e os gastos de salário dos servidores envolvidos nas atividades de produção e testagem (técnicos, pesquisadores, pessoal administrativo), não serão levados em consideração. Os CUSTOS DIRETOS serão os valores dos custos básicos na produção do "protótipo de ELISA para LTA" e os custos dos materiais do laboratório do INI para a testagem dos soros dos pacientes e o grupo controle. Todos os valores serão calculados em reais brasileiros (R$) com conversão para dólares americanos (US$) de acordo com a cotação na época da análise. Objetivos alcançados do subprojeto do bolsista foram auxiliar na etapa de validação dos protótipos de ELISA no LaPClinVigiLeish; auxiliar o processo de alimentação do banco de dados e RedCap para análise dos resultados; auxiliar na criação e alimentação das planilhas de custos para análise de custo-efetividade dos protótipos; acompanhar outras rotinas de diagnóstico e pesquisa no LaPClinVigiLeish. A validação dos protótipos ainda está em execução, portanto não há resultados que possam ser mostrados como conclusivos.

Bolsista: BEATRIZ DA SILVA MOREIRA
Orientador(a): CLAUDIO TADEU DANIEL RIBEIRO
Resumo: Influência da atividade física no desempenho cognitivo-comportamental na homeostase e após a infecção plasmodial murina não-grave Beatriz da Silva Moreira*,Luciana Pereira de Sousa Vieira** & Cláudio Tadeu Daniel Ribeiro**Laboratório de Pesquisa em Malária do Instituto Oswaldo Cruz**, PIBITI-Substituição em fevereiro de 2025*O sistema imune desempenha papel fundamental na função cognitivo-comportamental através de suas propriedades ativadoras ou supressoras da resposta imune e de forma dependente da natureza e da intensidade dos estímulos que exerce. A malária, doença infecto-parasitária causada por protozoários do gênero Plasmodium, é associada a sequelas neurocognitivas, sobretudo quando da sua forma cerebral (a malária cerebral, MC), complicação mais grave e letal em humanos e modelos experimentais. Também se tem relatado a associação de episódios maláricos não graves (MnG) ao mau desempenho em eventos neurocognitivos, associados ao aprendizado e memória em humanos. Nosso grupo observou um impacto tardio da MnG no desempenho cognitivo em um modelo experimental murino susceptível ao desenvolvimento de malária cerebral. No trabalho, a influência de estímulos imunes em diferentes paradigmas cognitivo-comportamentais (memória e ansiedade) foi estudada em camundongos C57BL/6: i) na homeostase e ii) após MnG por Plasmodium berghei ANKA (PbA), modelo experimental clássico de MC, sendo os animais tratados, entretanto, antes do comprometimento cerebral que ocorre no sexto dia de infecção. Observou-se que a infecção pode causar déficits de memória e induzir comportamento ansioso de longo prazo detectados tardiamente após um episódio único de MnG. A imunização com estímulos anti-inflamatórios em sua composição, incluído vacinas largamente usadas em seres humanos como aquela contra a difteria e o tétano (dT), aprimorou a memória de longa duração de camundongos sadios adultos e evitou a manifestação do déficit comportamental detectado tardiamente nos camundongos com episódio prévio de MnG por PbA, sugerindo um efeito promotor benéfico da imunização no desempenho cognitivo-comportamental e reforçando a reconhecida importância do sistema imune na performance neurocognitiva. Recentemente, a comunidade científica dirigiu a sua atenção aos possíveis efeitos do exercício físico, que parece beneficiar a função do sistema imune, no desempenho cognitivo-comportamental. Nossa proposta é estudar a influência de estímulos potencialmente promotores de imunomodulação e alterações fisiológicas e metabólicas, como o exercício físico, em combinação ou não com os estímulos imunes estudados anteriormente mencionados sobre os processos cognitivo-comportamentais na homeostase e após a malária experimental não grave. Palavras-chave: malária não-grave, exercício físico, memória, ansiedade.

Bolsista: TIAGO MARTINS MARQUES
Orientador(a): CARLOS EDUARDO CALZAVARA SILVA
Resumo: A dengue é uma das doenças infecciosas mais prevalentes e desafiadoras da atualidade, com impactos significativos nos sistemas de saúde, especialmente em países tropicais e subtropicais. O vírus da dengue (DENV) possui quatro sorotipos distintos e é transmitido principalmente pelo mosquito Aedes aegypti., Não há, até o momento, antivirais aprovados para seu tratamento, tornando urgente a busca por novas estratégias terapêuticas eficazes. Estudos recentes têm demonstrado que o DENV se aproveita do metabolismo lipídico da célula hospedeira para viabilizar sua replicação, especialmente por meio da lipofagia e da Beta-oxidação de ácidos graxos, processos responsáveis pela geração de ATP e pela modulação do ambiente intracelular favorável à multiplicação viral. O presente estudo teve como objetivo avaliar o papel do receptor adrenérgico alfa 1A (ADRA1A) na replicação do DENV. Esse receptor é envolvido na regulação da lipofagia e da oxidação de ácidos graxos, o que o posiciona como um possível alvo para intervenção antiviral. A partir de uma triagem farmacológica realizada na plataforma DrugBank, foi identificado o Cloridrato de Tamsulosina (CT) como antagonista de ADRA1A. O CT é um fármaco amplamente utilizado no tratamento da hiperplasia prostática benigna e apresenta perfil farmacológico seguro, o que torna seu reposicionamento para o tratamento da dengue uma alternativa estratégica, de baixo custo e potencial translacional. Foram realizados ensaios in vitro utilizando a linhagem celular AML12, e o sorotipo DENV-2. Ensaios de citotoxicidade (CC50) demonstraram que o CT não apresenta toxicidade para células AML12 até a concentração de 100 microM. Em paralelo, ensaios de concentração efetiva (CE50) evidenciaram que o CT promoveu redução superior a 90% na formação de unidades formadoras de placas (UFPs) em células AML12 infectadas, com índice de seletividade superior a 100, indicando potencial atividade antiviral com baixo impacto citotóxico. Experimentos adicionais indicaram que o CT induz redução de UFPs quando administrado após a infecção viral, sugerindo que sua ação interfere em etapas da replicação. Foram também padronizados protocolos de imunofluorescência para detecção das proteínas virais NS1 e Envelope, além da marcação específica da proteína ADRA1A, possibilitando a futura quantificação e localização subcelular desses alvos em condições experimentais diversas. Conclui-se que a inibição do receptor ADRA1A pelo Cloridrato de Tamsulosina representa uma abordagem promissora para o bloqueio da replicação do DENV. Os resultados reforçam a relevância do metabolismo lipídico como componente essencial na biologia do vírus e consolidam o ADRA1A como um potencial alvo terapêutico. Estudos futuros incluirão a quantificação de corpúsculos lipídicos por imunofluorescência e ensaios bioquímicos, análise da expressão gênica de ADRA1A e quantificação da expressão das proteínas ADRA1A, NS1 e envelope por imunofluorescência.

Bolsista: Mila Oliveira Nascimento
Orientador(a): Milena Botelho Pereira Soares
Resumo: O tratamento etiológico da doença de Chagas ainda se restringe ao uso de benzonidazol ou nifurtimox, medicamentos eficazes apenas na fase aguda da doença e frequentemente associados a efeitos adversos, o que limita seu uso em pacientes com a forma crônica. Diante disso, a busca por novas terapias anti-T. cruzi torna-se cada vez mais urgente. Neste estudo, avaliamos o potencial antiparasitário do complexo de rutênio contendo tiobenzamida (FOR0212A) em modelo experimental de infecção chagásica aguda. Inicialmente, investigamos a toxicidade aguda do complexo em diferentes doses (5, 10 e 20 mg/kg). Os animais tratados foram monitorados por 14 dias quanto a sinais de toxicidade, e o peso corporal foi registrado nos dias 0, 7 e 14. Não foram observadas alterações comportamentais, na aparência ou no peso dos animais, sugerindo ausência de toxicidade nas doses testadas. Na etapa seguinte, avaliamos a eficácia do complexo FOR0212A no controle da parasitemia. Camundongos foram infectados com 10 tripomastigotas da cepa Y e tratados por via oral, a partir do quinto dia pós-infecção, com diferentes doses do complexo. O benzonidazol (100 mg/kg) foi utilizado como controle positivo. A parasitemia foi monitorada nos dias 5, 8, 10 e 12 após a infecção. O tratamento com FOR0212A nas doses de 10 e 20 mg/kg promoveu reduções significativas da parasitemia (47,1% e 50,2%, respectivamente; p < 0,05) em comparação ao grupo controle. O benzonidazol, por sua vez, reduziu os níveis parasitários em mais de 99,5% (p < 0,05). Em conclusão, o complexo FOR0212A demonstrou ser seguro nas doses avaliadas e apresentou atividade antiparasitária relevante em modelo de infecção aguda, configurando-se como uma alternativa promissora para o tratamento da doença de Chagas.

Bolsista: HELENA DO NASCIMENTO LIMA TRECE
Orientador(a): JACKLINE DE PAULA AYRES DA SILVA
Resumo: A obesidade prolongada pode levar a diversos distúrbios secundários, entretanto, pouco é dito sobre o seu papel durante o processo de geração das células hematopoiéticas e de seus efeitos a longo prazo. Sabe-se que animais induzidos à obesidade durante a gestação apresentaram acúmulo de lipídeos nas placentas, e o fígado fetal exibiu aumento de macrófagos circulantes, e de células tronco hematopoiéticas (CTH) e de células ovais. A obesidade tem sido associada ao aumento do estresse oxidativo e à geração de espécies reativas de oxigênio (ROS) e as células tronco mesenquimais (CTM) são particularmente sensíveis à presença de níveis supra-fisiológicos de ROS, aumentando o dano de DNA e estimulando a diferenciação de adipócitos derivados de CTM in vitro. Diante do aumento de pessoas com sobrepeso e a obesidade, e considerando que o aumento de ROS pode levar ao dano do DNA, qual seria a influência deste excesso de lipídeos e exposição precoce das CTH aos ROS para a formação do sistema hematopoiético, na quantidade e qualidade das CTH geradas? Será que essa exposição precoce poderia gerar danos no DNA que levariam a doenças hematopoiéticas no adulto?Assim, o objetivo deste trabalho é estudar as alterações na hematopoese em modelo de obesidade e diabetes e explorar os mecanismos associados a geração e aos nichos de CTH no adulto.Para tal, utilizaremos um modelo de mutação espontânea, no qual analisaremos 5 animais homozigotos para o alelo Leprdb/J (obesos) e 3 animais heterozigotos (magros) de cada sexo, por cada ponto de coleta, que será realizado de 8 a 24 semanas de vida. Todos os animais terão acompanhamento: ponderal e de glicemia, análises citológicas (sangue periférico e medula óssea) e histopatológicas dos órgãos adultos (fígado, pâncreas, baço, timo e medula óssea: costelas, fêmures e coluna). Na vigência anterior já coletamos órgãos dos seguintes pontos de análise: 4 fêmeas e 1 macho obesos de 12 semanas, 2 fêmeas obesas de 14 semanas, 2 machos obesos de 15 semanas, 3 fêmeas obesas de 16 semanas, 2 fêmeas obesas de 22 semanas; Além dos controles: 3 fêmeas e 1 macho de 12 semanas, 3 fêmeas e 3 machos de 14 semanas, 3 fêmeas e 3 machos de 15 semanas, 1 fêmeas de 16 semanas e 3 fêmeas e 3 machos de 22 semanas. Esse material já foi fixado, processado histologicamente e estão em processo de corte e coloração. Já temos resultados preliminares das análises histopatológicas de lâminas coradas por hematoxilina e eosina das medulas ósseas de 12 e 16 semanas.Assim, com o nosso projeto esperamos descrever as alterações histopatológicas observadas nos órgãos coletados, com ênfase para a medula óssea. Esperamos descrever alguns mecanismos de como a obesidade pode influenciar a diferenciação das células hematopoiéticas e composição dos nichos medulares, podendo culminar em doenças.