Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição 2

Bolsista: ANA CAROLINA RODRIGUES MOREIRA GOMES
Orientador(a): LIVIA DERIS PRADO
Resumo: As nitrosaminas, um vasto grupo de componentes N-nitrosos, são consideradas impurezas em produtos farmacêuticos com potencial risco de induzir a formação de câncer. Desde 2018, diferentes produtos foram retirados do mercado devido à alta presença dessas impurezas, o que estimulou ações por parte das agências reguladoras para mitigar riscos relacionados à saúde do paciente. Recentemente, a Anvisa publicou resoluções que regulamentam o controle desses componentes em medicamentos. Com isso, ficam estabelecidos os prazos para enquadramento regulatório e as etapas que devem ser cumpridas pelas empresas produtoras de medicamentos para controle das nitrosaminas. Nesse contexto, o Instituto de Tecnologia em Fármacos (Farmanguinhos) vem reunindo esforços para implementar atividades para garantir o controle das nitrosaminas em seus medicamentos. Presentes no portfólio de Farmanguinhos, medicamentos contendo rifampicina apresentam risco de presença de nitrosaminas. Em outubro de 2020, foi relatada na literatura científica a presença da impureza 1-nitroso-4-metilpiperazina em lotes de rifampicina, fármaco utilizado para o tratamento de tuberculose. Assim, prende-se com este projeto desenvolver um método analítico para determinação de nitrosamina na rifampicina e nos diversos produtos de Farmanguinhos que contêm o fármaco. Inicialmente, será realizada uma busca na literatura científica para verificação de possíveis métodos por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas. Após a definição do método base, os parâmetros cromatográficos serão variados, assim como as condições de detecção, para que seja obtido um método com sensibilidade adequada. Com o método definido, os medicamentos serão avaliados e para isso, o efeito matriz e as técnicas de preparo de amostras serão estudados. O projeto traz oportunidades de inovação à medida que métodos analíticos inéditos sejam desenvolvidos para o controle de qualidade de medicamentos contendo rifampicina, incluindo os avanços tecnológicos na detecção por espectrometria de massas.

Bolsista: PATRICIA DE MATOS DE MOURA
Orientador(a): TATIANA MARON GUTIERREZ
Resumo: A malária é uma doença infecciosa causada por protozoários do gênero Plasmodium, que afeta principalmente regiões carentes do mundo e pode evoluir para formas graves, incluindo a malária cerebral (MC). Durante a infecção, o parasita invade as hemácias do hospedeiro e provoca uma resposta inflamatória, que leva à produção de espécies reativas de oxigênio e nitrogênio. A presença de heme e hemozoína, produtos da digestão da hemoglobina, contribui para o estresse oxidativo intravascular e pode resultar em alterações neurológicas, incluindo danos às mitocôndrias. É importante ressaltar que existem tratamentos para malária, como o uso de anti-maláricos mas ainda não existem tratamentos para as sequelas e danos decorrentes da MC. Nesse contexto temos as células-tronco mesenquimais (CTMs), que são células multipotentes com a capacidade de autorrenovação e diferenciação. Elas possuem efeito imunomodulador, e suas mitocôndrias têm um papel importante na sinalização e diferenciação celular. Estudos mostram que a transferência de mitocôndrias de CTMs pode restaurar a respiração celular e modular o metabolismo oxidativo. Desse modo, o transplante de mitocôndrias derivadas de CTMs pode ser uma forma de atenuar o estresse oxidativo nas células endoteliais danificadas pela infecção da MC.

Bolsista: Isabela Kiselar Teixeira
Orientador(a): INGRID FONSECA CASAZZA
Resumo: O objetivo desta pesquisa é realizar uma análise histórica do projeto de transposição das águas do Rio São Francisco a partir dos anos de 1980, considerando os antecedentes e debates acerca dele, seus objetivos, o processo de implantação e, sobretudo, os impactos ambientais e implicações sanitárias. Tradicionalmente conhecido no Brasil como Velho Chico, ou como o rio da integração nacional, o Rio São Francisco tem sua nascente localizada em Minas Gerais e deságua na divisa entre Alagoas e Sergipe, após banhar outros Estados. A região do Rio São Francisco é atualmente palco de grave crise ecológica e de série de conflitos pelo uso da água que inclui acesso limitado das populações locais a este recurso. É um dos ecossistemas que mais sofreu intervenções a partir da segunda metade do século XX no país e foi foco de projetos modernizadores que conduziram um processo de reconfiguração que ocasionou impactos ambientais e sanitários em busca do desenvolvimento regional. No Brasil a partir da década de 1940 foram implementados planos de desenvolvimento regional que visavam à ocupação e o aproveitamento dos recursos naturais para reposicionamento da economia nacional no contexto planetário dos programas de desenvolvimento (D’Araújo, 1992; Staples, 2006). Nesta região as águas do São Francisco eram o principal recurso a ser explorado e a política de desenvolvimento teve início em 1945 com a criação da Companhia Hidrelétrica do São Francisco. Nas últimas décadas do século XX, na mesma lógica desenvolvimentista, foram retomadas com fôlego renovado as antigas discussões sobre a proposta de transferência de água do São Francisco para bacias hidrográficas do Nordeste Setentrional. Em 2007, após a concretização das ideias em um projeto que foi levado adiante, tiveram início as obras de transposição e em 2017 foram inauguradas as primeiras etapas deste empreendimento. Assim como a implantação de usinas hidrelétricas, a transposição do São Francisco exigiu grandes obras que provocaram impactos ambientais. O recorte cronológico da pesquisa tem início em 1980, década na qual começaram a ser apresentados e discutidos novos projetos baseados no desvio de águas do Rio São Francisco como o projeto apresentado em 1983 por Mário Andreazza que disputava indicação como candidato à presidência da República. O marco final no ano de 2022 refere-se ao acompanhamento dos efeitos e dos impactos promovidos pelas obras do projeto de integração no momento em que foram concluídos os eixos Norte e Leste e as águas do velho Chico chegaram ao Estado do Rio Grande do Norte. Durante o último ano a bolsista chegou a resultados de pesquisa relevantes acerca da discussão do projeto de transposição durante a década de 1980. A partir das pesquisas realizadas por ela na Hemeroteca Digital da Biblioteca Nacional tomamos conhecimento das críticas elaboradas por Dirceu Murilo Pessoa, sociólogo e economista recifense que foi apontado em algumas reportagens como personagem importante para inviabilização do projeto de transposição naquele momento. Pessoa foi funcionário da Superintendência do Desenvolvimento do Nordeste (Sudene), onde exerceu diversas funções de assessoria e direção durante a década de 1960. Nos anos de 1980 atuou como diretor do Departamento de Economia do Instituto de Pesquisas Sociais, da Fundação Joaquim Nabuco (Fundaj), quando produziu, a pedido do Departamento Nacional de Obras e Saneamento (DNOS), uma análise sobre a viabilidade das obras de transposição do rio São Francisco. Assim, um dos principais objetivos durante a próxima vigência da bolsa será focar na compreensão e análise da discussão da proposta de transposição que circulou no âmbito do DNOS na década de 1980, bem como no entendimento do que levou a sua inviabilização. Dirceu Murilo Pessoa também será objeto de estudo no intuito de averiguar sua atuação enquanto crítico deste projeto.

Bolsista: ELANE PEREIRA DA SILVA
Orientador(a): ALINE FAGUNDES DA SILVA
Resumo: Este projeto objetiva iniciar o aluno do Programa de Inovação TEcnologica (PIBITI) da Fiocruz na cultura da inovação, realizando pesquisa sobre patentes ligadas ao projeto de pesquisa desenvolvido para o diagnóstico das leishmanioses e realizado em nosso laboratório, com resultados consistentes com a literatura cientifica sobre a doença. A pesquisa será realizada em bases de periódicos acadêmicos e de patentes, de acesso gratuito e aberto. OS resultados das pesquisas nas duas bases, bibliográfica e patentária, serão comparados, identificando os produtos e processos comuns em ambas as bases. Espera-se que o aluno adquira os fundamentos básicos para a leitura de documentos de patentes, bem como entendimento mínimo introdutório do processo de pesquisa-desenvolvimento tecnológico- inovação em saúde e de pesquisa translacional, conceitos extermamente importantes para um pesquisador ou estudante dentro de um Programa de Iniciação Tecnológica. A partir dos resultados do projeto será avaliado o impacto das pesquisas em leishmanioses na saúde pública, no tocante ao assunto do projeto, bem como será possível identificar oportunidades e lacunas para desenvolvimento e inovação.

Bolsista: BRUNA DOS REIS
Orientador(a): Flavia Martinez de Carvalho
Resumo: As fendas orais (FO) são uma anomalia congênita (AC) comum de etiologia complexa com prevalência variando de acordo com a localização geográfica, etnia e situação socioeconômica. A maioria das FO não está relacionada a síndromes, e são classificados com base na severidade das regiões anatômicas envolvidas. O componente genético é relevante como demonstrado pelo aumento do risco em 10 vezes em gêmeos monozigóticos quando comparado a gêmeos dizigóticos. A identificação de genes contribuindo para o aumento do risco das FO tem sido um desafio nas últimas décadas em todo o mundo, com expressivos gastos de financiamento, sem que tenhamos atingido um patamar de conhecimento aceitável. O progresso dos estudos descobriu uma série de genes de suscetibilidade, com destaque ao gene IRF6, responsável por aproximadamente 12% de todas as FO. Porém, considerando o risco atribuível a cada gene não conseguimos explicar 20% dos casos de FO. A maior parte da dificuldade resulta da heterogeneidade etiológica. A principal estratégia para contornar essa situação é a utilização de subfenótipos de FO para aumentar a homogeneidade dos grupos afetados e não afetados dentro de uma família e com isso aumentar o poder de prova dos estudos moleculares. O objetivo geral do subprojeto é contribuir com mais uma etapa do projeto maior no qual está inserido - aprimorar o conhecimento sobre os principais fatores genéticos na causalidade das FO em uma amostra do Rio de Janeiro para aplicação futura em aconselhamento genético. Como objetivo específico destaca-se a análise epidemiológica preliminar integrada aos subfenótipos de FO nesta amostra. Os exames para a identificação de subfenótipos nas famílias com pacientes com FO serão a ultrassonografia do músculo orbicularis oris do lábio superior com a utilização de um equipamento portátil; o exame dentário para identificação de anomalias dentárias e a estereofotogrametria de face para gerar o modelo 3D e executar morfometria geométrica tridimensional em busca de assimetria facial nos familiares não afetados pelo fenótipo. As análises iniciais irão focar na associação entre o componente epidemiológico e subfenotípico para um maior entendimento sobre a determinação destes no risco aumentado de recorrência de FO. O grande projeto no qual este subprojeto está inserido foi iniciado em 2019 no Âmbito do edital Ideias Inovadoras (VPPIS/Fiocruz). As coletas de amostras foram interrompidas em março de 2020 em virtude da pandemia da Covid-19. Nos três meses de coleta, a equipe conseguiu examinar um total de 20 famílias portadoras de FO e coletar dados clínicos e subfenótípicos além da coleta de amostra biológica. É importante destacar os avanços da equipe nas análises de morfometria geométrica facial tridimensional assim como as análises dos demais subfenótipos coletados nestas 20 famílias durante o período de trabalho remoto. A aluna PIBITI com os dados clínicos, epidemiológicos e subfenotípicos coletados neste período, conforme cronograma anexado na plataforma PIBITI. A aluna PIBITI será treinada e acompanhada presencial e remotamente pela orientadora e equipe. A aluna PIBITI participará da coleta de amostras em trabalho de campo para que a mesma possa ser treinada e qualificada neste tipo de atividade. Sob a mesma condição anteriormente exposta, a aluna PIBITI participará das etapas laboratoriais para a extração de DNa das amostras coletadas, quantificação da mesma e armazenamento no bio-repositório do projeto. Além disso, a aluna PIBITI acompanhará o desenvolvimento de técnicas de biologia molecular com estas amostras a fim de aprender as técnicas embora não seja o foco central do subprojeto. A amostra proposta neste subprojeto será proveniente do CEFIL-HMNSL e do CTAC-RJ, dois centros de referência no tratamento e assistência de pacientes portadores de FO. Vale ressaltar que é uma metodologia inédita com amostra familiar de pacientes com fenda oral no Rio de Janeiro. Cronograma de atividades: Duração de 12 meses. Ver arquivo subprojeto completo em anexo na plataforma PIBITI.

Bolsista: Gustavo Damasceno Müller Jansen Melo
Orientador(a): Patricia Sampaio Tavares Veras
Resumo: Os cães infectados por L. infantum apresentam um espectro dinâmico de formas clínicas, que podem variar desde uma infecção subclínica até uma doença grave, podendo ser fatal. A progressão da leishmaniose visceral canina (LVC) depende de diversos fatores, entre eles, o tipo de resposta imune desencadeada após a infecção. O papel que a resposta imune desempenha no contexto da progressão e controle da LVC ainda não está completamente compreendido. Mais precisamente, o envolvimento da resposta imunecelular na patologia da doença não são bem esclarecidos. A MO é um dos tecidos de predileção da L. infantum e as células mielóides são uma das principais células hospedeiras do parasita. No entanto, o papel dessas células no desfecho clínico da LVC ainda é pouco estudado. Em razão da necessidade de esclarecer a importância da MO na patogênese da LVC, o objetivo do presente trabalho é validar vias diferentemente modulas identificadas em células da MO de cães resistentes e cães susceptíveis. Em estudo anterior, ainda não publicado, realizamos o sequenciamento de RNA total de células de MO de cães resistentes e susceptíveis selecionados de uma coorte com duração de 4 anos, realizada em área endêmica para LVC. Também foram incluídos no estudo cães controle não infectados por L. infatum. Em seguida ao sequenciamento, os dados brutos gerados foram mapeados e analisados por bioinformática, onde foram identificados genes diferentemente expressos (DEGs) em células da MO de cães resistentes e cães susceptíveis, quando comparados com células da MO de cães controle. Posteriormente foram feitas análises de enriquecimento de anotação de ontologia gênica e vias relacionadas à migração celular e ao reparo de quebra dupla de DNA foram identificadas como diferentemente modulas nas amostras obtidas de cães resistentes e susceptíveis. No presente estudo, os cães resistentes, os susceptíveis e os controles serão reavaliados e novas amostras biológicas serão coletadas para realização da validação das vias que foram anteriormente identificadas como diferentemente moduladas. As vias relacionadas a migração celular serão validadas por ensaios de migração realizados em placas de transwell e as vias relacionadas ao reparo de quebra dupla de DNA serão validadas por ensaios de cometa neutro. Validar essas vias irá contribuir para o melhor entendimento da patogênese da doença e na identificação de potenciais alvos imunoterapêuticos.