Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição 2

Bolsista: DENIS AUGUSTO ARGOLO CAMPOS
Orientador(a): FRED LUCIANO NEVES SANTOS
Resumo: INTRODUÇÃO: Os cães são considerados reservatórios de importância epidemiológica para a doença de Chagas devido ao seu papel de sentinela, proximidade com os seres humanos e manutenção do ciclo de transmissão em ambientes domésticos e peridomésticos. Além disso, destaca-se a correlação existente com a soroprevalência em humanos. Mesmo com o impacto epidemiológico, a ausência de testes diagnósticos para a detecção de cães infectados é um importante entrave que traz riscos à saúde pública. Uma estratégia para ultrapassar esta limitação baseia-se na utilização de antígenos recombinates quiméricos do Trypanosoma cruzi. Nosso grupo, em um estudo de fase I, avaliou o potencial diagnóstico de quatro antígenos quiméricos e obteve resultados semelhantes aos encontrados em humanos. Desta forma, este estudo sucede ao de fase I, com um quantitativo amostral ampliado afim de avaliar os quatro antígenos quiméricos na detecção da infecção por T. cruzi por meio do ELISA indireto. OBJETIVO: Avaliar o desempenho diagnóstico dos antígenos recombinantes quiméricos do T. cruzi (IBMP-8.1, -8.2, -8.3 e -8.4) em imunoensaios para detecção de anticorpos IgG anti-T. cruzi em cães na forma crônica da doença de Chagas. MATERIAL E MÉTODOS: Os imunoensaios foram otimizados por checkerboard titration. Para o estudo de fase II foi avaliado o desempenho diagnóstico das IBMP a partir de 1.260 amostras séricas caninas provenientes de diferentes estados brasileiros. A reatividade cruzada para outras doenças infecto-parasitárias também foi avaliada em 752 amostras. Ao final, comparou-se o desempenho dos quatro antígenos com teste comercial humano adaptado à espécie canina. RESULTADOS: Os antígenos IBMP alcançaram valores de AUC que variaram entre 89,0-97,4%. O nível de exatidão variou de 87,8-96%. O maior índice de sensibilidade foi atribuído a IBMP-8.2 (90,3%), enquanto a IBMP-8.1, a IBMP-8.3 e a IBMP-8.4 obtiveram 74,8%, 72,6% e 79,6%, respectivamente. A maior especificidade encontrada foi para a IBMP-8.4 (99,6%), seguida pela IBMP-8.1 (90,6%), IBMP-8.2 (96,5%) e IBMP-8.3 (99,0%). O teste comercial adaptado, o Gold Elisa Chagas, apresentou sensibilidade de 62,3%, especificidade de 98,6% e acurácia de 89,9%. O menor índice de reatividade cruzada foi alcançado com a IBMP-8.2 com 0,9%, sendo esta molécula a que mais se aproximou de um teste ideal. CONCLUSÃO: Devido ao bom desempenho das moléculas IBMP no diagnóstico da infecção por T. cruzi em cães, estas são promissoras para a identificação da doença de Chagas canina. A utilização combinada destes antígenos é uma alternativa que visa aumentar os valores de sensibilidade e especificidade em estudos futuros, bem como em outras plataformas diagnósticas.

Bolsista: FRANCISCA LETICIA DE SOUSA SALES
Orientador(a): GIORGIO SILVA DE SANTANA
Resumo: O Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos (Bio-Manguinhos) é um dos maiores centros de produção de imunobiológicos da América Latina, garantindo a autossuficiência em vacinas do Programa Nacional de Imunizações. O cumprimento das Boas Práticas de Fabricação visa à diminuição dos riscos inerentes a qualquer produção farmacêutica; como exemplo, a contaminação microbiana. Os contaminantes microbianos podem apresentar diversas origens e a identificação precisa da microbiota detectada é fundamental para que sejam investigadas as fontes de contaminação. O objetivo deste projeto é avaliar fatores de virulência de linhagens previamente identificadas como pertencentes ao complexo Burkholderia cepacia (CBc), isoladas de uma indústria de imunobiológicos. Aproximadamente 40 linhagens serão avaliadas quanto a formação de biofilme e sua tolerância a desinfetantes em superfícies de poliestireno em microplacas e em aço inox por microscopia eletrônica de varredura. Será avaliada a atividade agregativa e o perfil resistência frente a antimicrobianos, determinado pelo método de disco-difusão em ágar. A partir da avaliação das características fenotípicas das linhagens serão determinados o(s) desinfetantes(s) mais eficaz(es) para a eliminação do biofilme produzido por cada linhagem. Como perspectiva, espera-se realizar do sequenciamento do genoma completo para pesquisa de genes associados a fatores de virulência, incluindo a formação de biofilme, e resistência antimicrobiana. Espera-se com este projeto, implementar melhorias nos procedimentos de limpeza e desinfecção nas superfícies das áreas produtivas de Bio-Manguinhos, contribuindo na estratégia de controle de contaminação dentro da indústria.

Bolsista: IVAN MENDONCA CHOR
Orientador(a): Cristiana Facchinetti
Resumo: O objetivo deste subprojeto é investigar o papel das redes católicas na diplomacia e no acolhimento de refugiados judeus e católicos expatriados pelo III Reich. Especial atenção será dada à análise das negociações entre o Ministério do Exterior e o Vaticano para a fuga e a responsabilização pela recepção de um grupo de mil refugiados para a fuga da Europa nazificada (Milgram, 1994; Carneiro, 1988), em especial o papel da Igreja na assistência à saúde mental desses indivíduos (Cytrynowicz, 2005). A investigação faz parte de uma nova historiografia que se formou recentemente acerca da atuação da Igreja Católica no III Reich (Ickx, 2021; Santos, 2022) após a abertura dos arquivos do Papa Pio XII (Vaticano), e colabora com o conhecimento sobre a assistência aos refugiados no Brasil durante a II Guerra. A pesquisa estará inserida em uma investigação coletiva de cunho prosopográfico coordenado pela orientadora. Por isso, estratégias de coleta, organização e sistematização das fontes participarão de protocolos e metodologias compartilhados, em conjunção com políticas de humanidades digitais sob a ética da ciência aberta. Consideramos o desenho de pesquisa e treinamento para trabalho coletivo e ético, a pesquisa se destaca não apenas pela temática importante para o presente, mas também por seu papel para a formação de futuros pesquisadores, como o candidato. Objetivo geral Investigar o papel das redes católicas na diplomacia e no acolhimento de mil refugiados judeus e católicos expatriados pelo III Reich entre os anos de 1940 e 1941 Objetivos específicos • Investigar a historiografia sobre o papel da Igreja Católica no período do Entreguerras e seu papel frente a refugiados expatriados pelo III Reich; • Identificar as diferentes redes de cunho católico a que pertenceram indivíduos do grupo até a chegada no Brasil; • Apresentar o papel das redes católicas locais no apoio a esses refugiados diante do antissemitismo e dos fascismos locais. • Analisar os discursos das entidades católicas que participaram dessa rede, bem como de seu papel social e político frente aos refugiados. Metodologia Etapa 1: o estudo da historiografia sobre o tema; treinamento para uso de ferramenta de I.A para transcrição de manuscritos; treinamento para base bibliográfica Zotero; treinamento para trabalho em arquivo e sistematização de fontes. Etapa 2: pesquisa empírica: o bolsista irá participar do preenchimento do item “redes de apoio” na planilha referente aos mil refugiados a partir das pesquisas nos arquivos do Arquivo Nacional (online); do Vaticano (online) e do Arquivo da Cúria Metropolitana do Rio de Janeiro. Utilizará, ainda, o material já organizado pela orientadora do Arquivo do Itamaraty. Resultados esperados • Apresentação de 02 trabalhos em eventos - ANPUH e Fiocruz • Produção de nota de pesquisa com orientadores • Participação em Guia de fontes (item fontes da igreja católica). • Relatório final • projeto de PIBIC para a sua continuidade junto à pós-graduação. Referências Bibliográficas CARNEIRO, Maria Luiza Tucci. O Anti-semitismo na Era Vargas. São Paulo: Editora Brasiliense, 1988. CYTRYNOWICZ, Ronye. Instituições de assistência social e imigração judaica. História, Ciências, Saúde-Manguinhos, vol. 12, n. 1, p. 169-184, 2005. FRIEDLÄNDER, Saul. Pio XII e o Terceiro Reich [1964]. Porto: Sextante Editora, 2020. ICKX, Johan. Os judeus de Pio XII. O verdadeiro papel do Papa Pacelli. O círculo íntimo de Pio XII e a sua atuação durante a Segunda Guerra Mundial. Estoril: Vogais & Companhia, 2021. MILGRAM, Avraham. Os Judeus do Vaticano: A tentativa de salvação de católicos não-ariários da Alemanha ao Brasil através do Vaticano (1939-1942). Rio de Janeiro: Imago, 1994. SANTOS, Jair. A diplomacia pontifícia e os refugiados judeus no Brasil (1939-1941): uma investigação preliminar nos arquivos de Pio XII. Revista de História, n. 181, p. 1-34, 2022.

Bolsista: RICHARD DE ALMEIDA LIMA
Orientador(a): ALEXANDRE DOS SANTOS DA SILVA
Resumo: Casos de pneumonia de etiologia desconhecida foram detectados em Wuhan, na China em dezembro de 2019. Esses casos aumentaram e se distribuíram pelo mundo, sendo declarado como emergência de saúde pública de interesse internacional pela OMS em 30 de janeiro de 2020. Em 11 de março de 2020, a OMS decretou a situação com o novo coronavírus (SARS-CoV-2) como uma pandemia mundial. A doença causada pelo SARS-CoV-2 recebeu o nome oficial de “Coronavirus Disease 19” (Covid-19). Desde então, a epidemia de Covid-19 causou 647 milhões de casos notificados e 6 milhões de óbitos mundialmente (dados de 1 de abril de 2023). O SARS-CoV-2 pertence à família Coronaviridae, causando, no homem desde um resfriado comum à comprometimentos respiratórios mais graves. Pela rapidez na expansão de casos observada na pandemia de Covid-19 e emergência de novas variantes, possivelmente mais virulentas, o desenvolvimento de estudos in silico e pré-clínicos in vivo para avaliar novos tratamentos da doença, como o uso de anticorpos anti-SARS-CoV-2 ainda é extremamente importante no tratamento da doença. O efeito desejado de um imunobiológico de ação terapêutica contra o COVID-19 seria a redução significativa da replicação no trato respiratório do SARS-CoV-2 e de sua disseminação no ambiente. De igual importância seria a redução da inflamação no trato respiratório do hospedeiro, com consequente melhora da função pulmonar. Nesta proposta, desenvolveremos uma nova abordagem terapêutica com anticorpos IgY anti-SARS-CoV-2 já produzidos anteriormente pelo Laboratório de Desenvolvimento Tecnológico em Virologia (LADTV) da Fiocruz-IOC e compararemos com resultados anteriores da imunoterapia utilizando anticorpos equinos anti-SARS-CoV-2. Serão utilizados anticorpos IgY policlonais obtidos a partir de gemas de ovos de frangas poedeiras imunizadas com o SARS-CoV-2. Os anticorpos da classe IgY apresentam vantagens em relação aos anticorpos IgG, como: elevado rendimento; baixo custo de produção; maior aceitabilidade bioética; ausência de reação com receptores Fc.; elevada especificidade e avidez pelo alvo em comparação com a IgG. Ainda nesse contexto, será utilizado o modelo experimental Hamster sírio. Este modelo é capaz de desenvolver manifestação clínica respiratória, com alterações histopatológicas inflamatórias no trato respiratório compatíveis com a forma humana da doença quando infectado com o SARS- CoV-2. Sendo então importante como modelo experimental utilizado na infecção pelo SARS-CoV-2. A utilização de IgY anti-SARS-CoV-2 se apresenta como importante alternativa para o tratamento e profilaxia do SARS-CoV-2. Para avaliação desse anticorpo, também é importante realizar a comparação desse tratamento com outro tratamento utilizando IgG de mamíferos, como anticorpos equinos anti-SARS-CoV-2. Essa comparação trará respostas para se determinar qual a melhor opção no tratamento utilizando anticorpos anti-SARS-CoV-2 e se anticorpos de origem equina (IgG) são mais úteis no tratamento de infecções virais (como a causada pelo SARS-CoV-2) do que anticorpos de origem aviária (IgY). Ao final do presente projeto entregaremos como resultados o padrão de eficácia do tratamento da COVID-19 experimental com anticorpos IgY policlonais anti-SARS-CoV-2 e sua comparação com anticorpos equinos anti-SARS-CoV-2.

Bolsista: MARIA EDUARDA PINTO GONCALVES
Orientador(a): GEOVANE DIAS LOPES
Resumo: Este projeto propõe mapear as proteases de superfície da membrana plasmática de Leishmania spp. Essas enzimas são fatores de virulência relevantes e fazem parte dos componentes de superfície celular que atuam nos primeiros contatos do parasito com o hospedeiro. Diversas funções biológicas das proteases já foram descritas, porém há inúmeras lacunas sobre as classes e a quantidade destas enzimas na superfície do parasito. Nossa hipótese é que a utilização de um biossensor de refletância para detecção de proteínas na superfície da membrana plasmática é uma excelente ferramenta para a compreensão da expressão regulada destes componentes de superfície. Este projeto vai agregar conhecimentos estratégicos sobre as proteases que compõe a membrana de L. (V.) braziliensis e L. (L.) amazonensis indicando uma ampla possibilidade de ações destas enzimas no ciclo de vida do parasito e sua importância na adaptação aos seus respectivos hospedeiros. Por fim, a padronização deste modelo de membrana será útil em diversos ensaios de interação com alta sensibilidade, especificidade e reprodutibilidade da técnica para detecção das diferenças na membrana plasmática de diferentes espécies de Leishmania.

Bolsista: ELISE BITENCOURTE DE LAIA
Orientador(a): GEISA PAULINO CAPRINI EVARISTO
Resumo: O mulateiro, conhecido popularmente como pau-mulato, é uma árvore da espécie Calycophyllum spruceanum que pode atingir até 30 metros de altura, pertence à família Rubiaceae e à subfamília Cinchonoideae. Esta contém um perfil de metabólitos que englobam os alcalóides, iridóides e antraquinonas. A espécie C. spruceanum exibe um grande potencial farmacológico devido à produção de metabólitos secundários biologicamente ativos que podem ser usados no tratamento de doenças. Mesmo com poucos estudos para utilização com fins antiparasitário, pesquisas evidenciam que os metabólitos secoiridóides, secoxiloganino e diderrosideo, extraídos do mulateiro, apresentam alguma atividade antitripanosoma, na forma de tripomastigotas. A planta é conhecida como “árvore da juventude” por causa de sua utilização em afecções dermatológicas, além de ser empregada no tratamento cosmético de revitalização da pele por ter uma atividade antioxidante potente. Essa pesquisa tem como objetivo analisar os metabólitos presentes nos extratos aquosos e metanólicos da folha, caule e galho, explorar atividade de moléculas bioativas com atividade anti-plasmodium da Calycophyllum spruceanum. A extração aquosa das partes da planta (folha, caule e galho) consistiu em 20 minutos de decocção, banho ultrassônico por 60 minutos com posterior filtração à vácuo e liofilização das amostras. Os extratos metanólicos foram submetidos ao ultrassom durante 15 minutos, depois agitadas em agitador magnético por 60 minutos, após esses passos, o sobrenadante foi recuperado, centrifugado e depois concentrado no rotaevaporador. As extrações foram realizadas três vezes em cada solvente. Os extratos concentrados foram analisados por cromatografia líquida de ulta eficiência (CLUE) e as moléculas identificadas por espectrometria de massa sequencial (EM2) no Orbitrap QExactive Plus (ThermoFisher). Além disso, os extratos aquosos da folha e do caule foram fracionados por CLUE semi-preparativa e o rendimento de cada fracionamento foi calculado. Em relação aos dados das análises feitas no CLUE/EM2 e pesquisadas nos bancos de dados identificou-se 2.789 metabólitos, sendo 1.555 nomeados e 1.234 desconhecidos. Quase metade dos metabólitos encontrados não apresentam estudos e nem são reconhecidos pelos banco de dados. Além disso, foram disponibilizadas tabelas com os metabólitos mais abundantes e encontrou-se em artigos recentes várias atividades biológicas (antioxidante, antifúngica, anti-inflamatória, antiglicêmica e antibacteriana) relacionadas aos extratos de mulateiro. Considerando os resultados obtidos e os trabalhos pesquisados, pode-se concluir que há uma abundância de metabólitos sem estudos específicos do mulateiro, e até mesmo aqueles que são conhecidos não contém uma quantidade significativa de pesquisas. Por isso, é necessário continuar estudando e pesquisando, para futuramente testar esses metabólitos a fim de encontrar atividades antiparasitária, como a anti-plasmodium,e também testando em outros tipos de parasitos.