Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição 2

Bolsista: RAYANA SALES AZEVEDO
Orientador(a): Ivano Raffaele Victorio de Filippis Capasso
Resumo: A Doença Meningocócica (DM) apresenta uma série de sintomas, variando de febre alta, rigidez de nuca, petéquias, e pode se apresentar de duas formas: meningite e septicemia. O agente etiológico da DM é a Neisseria meningitidis (Nm), um diplococo Gram-negativo que pode ser encontrado na nasofaringe nos seres humanos que é seu único hospedeiro. A Nm pode ser classificada em 12 sorogrupos, mas os mais comuns são os tipos A, B, C, Y e W135. O objetivo principal deste estudo, é pesquisar a ocorrência de cepas de meningococos com susceptibilidade reduzida aos antibióticos beta-lactâmicos (penicilina, ampicilina, amoxicilina, cefotaxima e ceftriaxona), às quinolonas (ácido nalidíxico, levofloxacina e ciprofloxacina), cloranfenicol, azitromicina e rifampicina, isoladas de portadores assintomáticos de N. meningitidis na faixa etária de 15 a 35 anos no Rio de Janeiro. Essas linhagens estão preservadas na coleção de pesquisa do INCQS/FIOCRUZ. As cepas a serem analisadas foram objeto de estudo de uma tese de doutorado do Laboratório de Microrganismos de Referência do INCQS (LMR/INCQS). As cepas com diminuição da susceptibilidade, serão avaliadas quanto aos mecanismos de resistência para os antibióticos beta-lactâmicos, quinolonas, e rifampicina. Para os beta-lactamicos serão investigados a presença de genes produtores de beta-lactamase ou mecanismos de resistência associados à modificação da Proteína Ligadora de Penicilina (PBP) pelo sequenciamento do gene e posterior tradução para determinação de possíveis mutações. Par os outros antibióticos, os mecanismos de resistência a serem investigados, serão a modificação da proteína-alvo dos antibióticos, também pelo sequenciamento do gene e tradução da proteína. Os resultados obtidos serão de grande importância para conhecermos os níveis de susceptibilidade e os mecanismos de resistência de cepas de portadores com susceptibilidade reduzida aos principais antibióticos usados no tratamento e na profilaxia das doenças causadas por meningococos e o possível potencial de disseminação de cepas virulentas na população estudada.

Bolsista: GABRIEL ALVES DOS SANTOS ATTANAZIO
Orientador(a): ROSANA GENTILE
Resumo: A compreensão dos padrões e processos que estruturam as comunidades permite determinar não apenas os fatores relacionados à diversidade e distribuição das espécies, mas também avaliar quais são as espécies especialistas e generalistas em uma comunidade, além de ser uma característica importante nos estudos de redes ecológicas. Em relação ao parasitismo, a vulnerabilidade de uma espécie de hospedeiro a um parasito, a dependência deste ao hospedeiro e seu grau de especialização são fatores que influenciam a estrutura das comunidades e estão relacionados aos mecanismos de “spillover”, que ocorre quando um parasito passa a infectar uma nova espécie de hospedeiro. Uma das principais características de um parasito é o seu grau de especialização em hospedeiros, ou seja, o número de espécies de hospedeiros que ele pode explorar com sucesso. O grau de especialização de um parasito é uma característica de sua história de vida e consequência do processo de coevolução parasito-hospedeiro. A maioria dos parasitos apresenta um grau alto de especialização na exploração de seus recursos, contudo, trocas de hospedeiro são comuns. Características dos hospedeiros e variações locais na abundância de espécies hospedeiras, as quais influenciam nas taxas de contato interespecíficas, podem afetar o grau de especialização dos parasitos. Além disso, a composição da comunidade de parasitos no hospedeiro também é fundamental para a troca de hospedeiros. Estimativas do potencial zoonótico de parasitos podem ser feitas usando-se modelos preditivos sobre o compartilhamento de parasitos com diversos hospedeiros, incluindo o ser humano, ou usando-se abordagens baseadas em redes de interações parasito-hospedeiro. Deste modo, os conhecimentos básicos sobre como as comunidades de parasitos estão estruturadas, quais são os padrões encontrados nas interações parasito-hospedeiro e que fatores atuam nas forças destas interações são essenciais para a compreensão da relação entre a biodiversidade e a emergência ou re-emergência de zoonoses. O presente trabalho está inserido num projeto maior sobre biodiversidade, ecologia e parasitismo de pequenos mamíferos reservatórios e potenciais riscos de zoonoses em áreas de Mata Atlântica, trazendo informações essenciais para os aspectos relacionados à biodiversidade, bem como para a compreensão da estrutura das comunidades de parasitos e hospedeiros num dos biomas mais ricos em espécies do mundo. O objetivo geral deste projeto é determinar o grau de especialização de espécies-alvo de parasitos em redes de interações helmintos-pequenos mamíferos em áreas de Mata Atlântica utilizando-se como métrica a força de interação da relação parasito-hospedeiro em escalas local e regional. O estudo utilizará como modelo de estudo a interação ecológica parasito-hospedeiro entre helmintos gastrointestinais e pequenos mamíferos terrestres. O presente estudo utilizará amostras já coletadas em diversas localidades da Mata Atlântica. Informações complementares serão obtidas com dados de literatura e bases de dados. Para comparar o grau de especialização dos parasitos entre diferentes espécies hospedeiras e nas escalas locais e regionais será calculada a medida de força das espécies, a qual considera as somas das dependências de cada espécie na rede de interações. Maiores valores de dependência em uma determinada espécie hospedeira podem indicar maior especialização pelo parasito neste hospedeiro e sua necessidade para a manutenção do ciclo biológico. A medida de força das espécies será calculada utilizando-se presença e ausência, abundância média e prevalência de espécies de espécies-alvo de helmintos, os quais refletem a força de interação entre espécies em uma rede parasito-hospedeiro. Será testada a influência de possíveis fatores no grau de especialização dos parasitos em seus hospedeiros considerando-se escalas locais e regionais utilizando-se análises de Regressão Múltipla.

Bolsista: RANDRIN QUEIROZ VIANA FERREIRA
Orientador(a): FRED LUCIANO NEVES SANTOS
Resumo: A doença de Chagas (DC) é enfermidade negligenciada causada por um hemoflagelado denominado Trypanosoma cruzi. Trata-se de uma doença de curso bifásico, sendo representada pelas fases aguda e crônica. Estima-se que aproximadamente 5,7 milhões de pessoas estejam infectadas em 21 países da América Latina1 e, no Brasil, este número varia entre 1,9-4,6 milhões de pessoas2. O diagnóstico da infecção depende da fase clínica da doença e baseia-se em critérios clínicos, histórico epidemiológico do indivíduo e em exames laboratoriais. Na fase aguda, o diagnóstico é realizado através de métodos parasitológicos diretos e indiretos3. No entanto, na fase crônica, devido à baixa parasitemia, utiliza-se de métodos sorológicos indiretos como, por exemplo, imunofluorescência indireta (IFI), hemaglutinação indireta (HAI) e ensaio imunoenzimático (ELISA)4. Em virtude da ausência de um teste padrão-ouro para o diagnóstico na fase crônica, a OMS recomenda a utilização de dois testes em paralelo. A combinação dos resultados define o indivíduo como positivo, negativo ou inconclusivo5. Porém, o desempenho destes testes depende, dentre outros fatores, dos antígenos usados na sensibilização da fase sólida6 e do elevado polimorfismo genético apresentado pelo T. cruzi. Por este motivo os testes apresentam desempenho variável de acordo com a região geográfica onde são usados7. Dessa forma, muitos resultados apresentam discordância entre os dois testes usados, levando a um resultado inconclusivo e havendo a necessidade de um teste confirmatório para chegar a uma conclusão diagnóstica. Todavia, a DC carece de um teste confirmatório confiável e de alto desempenho para confirmação de discordância sorológica nos testes diagnósticos. O Western blotting, até o ano de 2016, era utilizado para esta finalidade 8. No entanto, a sua produção foi descontinuada, deixando uma lacuna no diagnóstico confirmatório da infecção em todo o mundo. Uma forma de ultrapassar tais obstáculos baseia-se na utilização de proteínas recombinantes quiméricas, formadas por regiões conservadas e repetitivas de diversas proteínas do T. cruzi em uma única molécula9. Esta estratégia possibilita manter os índices de desempenho elevados mesmo quando o teste é utilizado em regiões geográficas com circulação de diferentes linhagens genéticas. Desta forma, quatro proteínas recombinantes quiméricas foram desenvolvidas pelo nosso grupo por meio de técnicas de engenharia genética, as quais foram denominadas IBMP-8.1, IBMP-8.2, IBMP-8.3 e IBMP-8.4. O potencial diagnóstico de todas elas foram avaliadas em estudos de fase I, II e III utilizando o ELISA indireto, ELISA duplo antígeno, microarranjo líquido e imunocromatografia como plataformas diagnósticas, com resultados de acurácia que variaram de 95 a 100% (9, 10 - 11). Com base nos resultados encontrados, o nosso grupo objetiva avaliar o potencial diagnóstico dos antígenos IBMP para diagnosticar indivíduos cronicamente infectados pelo T. cruzi utilizando o Western blotting como ferramenta diagnóstica, suprindo a necessidade de uma metodologia para ser utilizada como testes confirmatório nos casos de sorodiscordâncias.

Bolsista: JOANA DUARTE DE OLIVEIRA JORDAO
Orientador(a): Cleber Galvao Ferreira
Resumo: Triatoma arthurneivai Lent & Martins e Triatoma wygodzinskyi Lent são potenciais vetores do Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença de Chagas. Essas espécies são muito semelhantes morfologicamente e, portanto, difíceis de serem diferenciadas. A correta identificação das espécies vetoras é importante, uma vez que cada uma pode apresentar diferentes graus de importância epidemiológica. O objetivo do projeto é realizar um estudo morfológico e morfométrico comparativo das genitálias femininas de T. arthurneivai e T. wygodzinskyi buscando novos caracteres diagnósticos para as duas espécies.

Bolsista: ANA BEATRIZ CALLEGARIO AMORIM
Orientador(a): VICTOR FACCHINETTI LUZ
Resumo: O câncer é uma doença complexa que varia extensivamente na forma como se apresenta, no seu desenvolvimento e nos sintomas de um paciente para outro. As estatísticas nacionais e internacionais não deixam dúvidas e servem de alerta para o grave problema de saúde pública mundial que representa essa doença. O câncer é a principal causa de mortes em países desenvolvidos e ocupa o segundo lugar nas taxas de mortalidade dos países em desenvolvimento. Apenas no Brasil, são estimados aproximadamente 630 mil novos casos da doença para o ano de 2018. Recentemente, moléculas bioativas e fármacos capazes de inibir de forma específica proteínas-alvo presentes em diversas linhagens de células cancerosas vem sendo desenvolvidos através de modificações racionais no esqueleto 2-fenilaminopirimidina (FAP), grupo farmacofórico presente no imatinibe, primeiro inibidor de tirosina quinase aprovado para uso clínico pelo FDA, em 2001. Nesse contexto, análogos do FAP contendo grupos heterocíclicos vem sendo reportados na literatura, incluindo derivados 2-fenilaminotiazólicos, que apresentaram resultados relevantes como inibidores de enzimas tirosina quinase. Dessa forma, propõe-se a síntese de uma série de derivados 2-fenilaminoselenazólicos, obtidos a partir da troca isostérica do núcleo pirimidínico do FAP pelo núcleo selenazólico, visando a identificação de novas moléculas líderes capazes de orientar o desenvolvimento racional de fármacos no combate ao câncer. As selenouréias substituídas, intermediários-chave do projeto, poderão ser sintetizadas a partir da reação da 2-metil-5-nitroanilina, obtida comercialmente, com o isoselenocianato de benzoíla, obtido in situ, seguida de hidrólise básica. Os produtos finais desejados serão obtidos, então, a partir de reações de Hantzch entre as selenouréias substituidas e diversas 2-bromoacetofenonas.

Bolsista: NICOLE CRISTINA CRUZ
Orientador(a): RAQUEL ELISA DA SILVA LOPEZ
Resumo: As leishmanioses representam um complexo de enfermidades crônicas causadas por espécies de parasitos do gênero Leishmania, que parasitam vísceras e pele, e são responsáveis por um amplo espectro de doenças crônicas tegumentares e viscerais com variada morbidade, mortalidade e epidemiologia. O número de casos tem aumentado em todo o mundo e tais doenças estão associadas à pobreza, mudanças climáticas, desmatamento, urbanização, dentre outros fatores. A terapia medicamentosa é um dos principais mecanismos de controle das leishmanioses, contudo, desde a década de 1940, os antimoniais pentavalentes têm sido as drogas de escolha. Embora eficazes, são muito tóxicos podendo acarretar lesões em órgãos e até mesmo a morte do hospedeiro. Além de que, o esquema terapêutico tem altíssimo custo e são observados parasitos viáveis nas cicatrizes de pacientes curados. Os medicamentos de segunda linha, são usados em áreas com altos índices de resistência aos antimoniais, contudo são drogas mais tóxicas, mais caras e com menor índice terapêutico. Todos os fármacos para o tratamento das leishmanioses são parenterais, com altas doses e com grande toxicidade, o que exige a internação e colaboração dos pacientes que muitas vezes abandonam o tratamento, favorecendo o aparecimento de cepas resistentes. Sendo assim, é necessário desenvolver drogas mais específicas, eficazes, de baixo custo, com reações adversas menos agressivas para o hospedeiro e de modo racional baseado nos alvos quimioterápicos da Leishmania. As proteases deste parasito são essências para sua fisiologia e para invasão, migração e proliferação destes no hospedeiro, ou seja, para a manutenção da infecção. Neste contexto, as serino proteases são importantes alvos quimioterápicos da Leishmania, visto que a inibição destas enzimas por inibidores de proteases (IPs) específicos naturais e sintéticos induziu alterações morfológicas no protozoário que culminou com sua morte. Os IPs polipeptídicos são utilizados na clínica para o tratamento de diversas doenças, bem como em procedimentos cirúrgicos, constituindo uma classe diferenciada de fármacos específicos e são opções de tratamento de doenças intratáveis pela terapia convencional. Portanto, a investigação do potencial terapêutico de IPs de Cajanus cajan como moléculas anti-Leishmania contribuirá para o desenvolvimento de medicamentos inovadores para o tratamento das leishmanioses, devido a sua grande especificidade, importante atividade biológica e baixa toxicidade.