Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição 2

Bolsista: FELIPE LIMA PEREIRA PERES
Orientador(a): MARCIO EDUARDO FELIX
Resumo: As coleções biológicas, como repositórios de biodiversidade e de registros de inúmeras pesquisas, são fundamentais para a ciência. Coleções de grande porte e antigas, como a Coleção Entomológica do Instituto Oswaldo Cruz (CEIOC), são patrimônios de valor incalculável, pois agregam também o valor histórico. O trabalho de curadoria visa garantir a preservação desse patrimônio, no sentido de manter, organizar, catalogar, prestar serviços e disponibilizar dados. Diante do passivo histórico que a CEIOC apresenta, causado pelo Massacre de Manguinhos, é fundamental o trabalho de organização, estudo e catalogação do acervo, o que permite melhor conhecimento do mesmo, orientando as ações da curadoria. Dessa forma, a coleção gradativamente atingirá melhores níveis de disponibilização de espécimes e dados para pesquisas. A subordem Auchenorrhyncha (ordem Hemiptera) apresenta alta diversidade, com mais de 42.000 espécies válidas, sendo cerca de 4.000 registradas no Brasil, e abrigando a família Cicadellidae, uma das dez maiores de insetos, com aproximadamente 21.000 espécies. Há várias espécies importantes para a agricultura, vetoras de uma série de fitopatógenos que prejudicam plantações de laranja, uva, cana-de-açúcar, café e pêssego, por exemplo. A CEIOC possui um acervo de Auchenorrhyncha considerável, entretanto necessitando de ações de organização, identificação e catalogação, que melhorarão as condições de fornecimento de dados para pesquisas nos campos da biodiversidade e da entomologia agrícola. Este projeto visa mitigar o passivo histórico da CEIOC, com foco no acervo da subordem Auchenorrhyncha. Os dados dos espécimes serão catalogados e analisados quali-quantitativamente. Serão realizadas avaliações sobre a composição taxonômica do acervo e sua representatividade frente à diversidade conhecida, indicando de quais táxons a coleção precisa adquirir espécimes. A representatividade geográfica também será verificada, elucidando biomas e localidades de maior riqueza na coleção e indicando aqueles em que coletas são necessárias. Uma análise histórica será conduzida, relatando os principais coletores que contribuíram para a formação da coleção, os anos em que as coletas foram realizadas e os pesquisadores que estudaram os espécimes, fazendo a identificação taxonômica dos mesmos. Espera-se aumentar o nível de organização, identificação e catalogação dos Auchenorrhyncha representados na Coleção Entomológica do Instituto Oswaldo Cruz, contribuindo, assim, para a melhoria do acervo como um todo. Com isso, gradativamente a curadoria terá um conhecimento mais detalhado acerca da coleção, podendo planejar e executar ações pontuais e globais para a sua melhoria de forma mais segura. Além disso, o projeto contribuirá de modo significativo para a disponibilização de dados dos espécimes de Auchenorrhyncha da CEIOC em sistemas e redes de informação sobre biodiversidade.

Bolsista: JOAO VICTOR DIAS RAMOS
Orientador(a): CECILIA VIANNA DE ANDRADE
Resumo: O rastreio do câncer do colo uterino de forma sistemática e organizada leva a uma queda na incidência do câncer cervical. Mesmo com a Introdução da vacinação contra o HPV, que é efetiva e leva a uma alta proteção ao câncer cervical, o rastreio continua sendo uma importante ferramenta para reduzir as taxas de câncer cervical em pacientes não imunizadas ou com cânceres relacionados aos Tipos de HPV não contemplados pela vacina. Com a evolução do rastreio e a melhor compreensão do processo de oncogênese do carcinoma escamoso do colo uterino, o NIC2, que até pouco tempo atrás era considerado um ponto de corte inequívoco para tratamento cirúrgico, atualmente é considerado uma lesão com alto percentual de regressão. Em 2018 foi publicada uma metanálise onde o percentual de regressão da NIC2 foi estimado em 50%, persistência em 32% dos casos e 18% para progressão, levando ao conhecimento atual que a maioria das lesões de NIC2 regridem espontaneamente, especialmente em pacientes jovens. Ainda não há critérios claros moleculares ou morfológicos que sejam preditivos de evolução das NIC2, apesar das recomendações da LAST 2012 sugerir a utilização do p16 para decisão de tratar ou acompanhar as pacientes, em estudos prévios do nosso grupo não é um exame acurado. A infecção persistente por HPV de alto risco é um dos principais fatores de risco para o carcinoma escamosos do colo uterino. Visando avaliar se o tipo de HPV encontrado pode ser preditivo de evolução ou regressão espontânea de NIC, foi proposto um estudo de coorte com pacientes de NIC2 para identificar biomarcadores úteis para diferenciar o NIC2 com maior potencial de regressão dos casos com maior potencial de progressão/persistência. Os casos de NIC2 foram incluídos de duas formas uma prospectiva ainda recrutando e seguindo as pacientes e uma retrospectiva com localização dos casos de NIC2 no arquivo da Coordenação diagnóstica de patologia. O diagnóstico de NIC 2 na biopsia foi definido pela concordância de pelo menos dois patologistas que avaliaram as amostras de forma independente, os casos de discordância formam definidos por diagnóstico de consenso entre três patologista avaliando o caso em conjunto. O desfecho clínico foi definido, nos casos tratados, pela análise do procedimento excisional. Os casos não tratados tiveram o desfecho definido pelo resultado da citologia, colposcopia de seguimento e/ou nova biópsia realizada por indicação do ginecologista, casos os achados de colposcopia e citologia não fossem concordantes foi considerado o achado mais grave, exceto nos casos em que foi realizado nova biópsia em que o resultado desta foi utilizada para definir o desfecho. Foi considerado como não regressão a persistência de NIC 2 ou mais no espécime histológico resultante de procedimento excisional ou de biópsia realizada por suspeita de progressão. A regressão completa foi definida pela ausência total de doença no espécime histológico de procedimento excisional ou em duas citologias e colposcopias negativas e com junção escamocolunar (JEC) completamente visível em intervalos semestrais. Casos que apresentaram lesão de baixo grau (NIC 1) foram considerados como regressão parcial. O DNA foi extraído do bloco de parafina das amostras com coleta retrospectiva e dos raspados cervicais das amostras com coleta prospectiva foram realizadas análise de qualidade do DNA extraído, PCR em tempo real para identificar o percentual de amostras positivas para HPV . Foram incluídas 147 amostras de NIC2, idade média das pacientes 34,9 anos e o percentual de regressão identificado na amostra foi de 55,1% e o de progressão foi de 19,1%. Para análise molecular 77 amostras retrospectivas e 20 prospectivas foram incluídas no estudo. A qualidade do DNA extraído das amostras parafinadas era muito inferior ao das amostras de raspado cervical. 60 % das amostras prospectivas foram positivas para HPV de alto risco. Ainda está em andamento o resultado dos sequenciamentos e estamos repetindo as análises das amostras retrospectivas com novos protocolos de purificação.

Bolsista: SUZANA DIONIZIO CESAR VELOSO
Orientador(a): Romulo de Paula Andrade
Resumo: A pesquisa tem como foco os discursos, atores, projetos e práticas envolvendo a história da Campanha de Merenda Escolar no Brasil, tendo como recorte temporal os anos de 1953 a 1970. Privilegia assim a composição do primeiro plano da adoção da merenda escolar no país, indo, por fim, ao período da ditadura militar, quando o programa passa por crises econômicas em razão do corte das ajudas alimentares internacionais operadas por órgãos e agências externas, até então doadoras de recursos e insumos. A ascensão dos debates envolvendo a necessidade de merenda escolar relacionam-se diretamente a um contexto mais amplo de reconhecimento da fome como um problema a ser enfrentado pelo Estado brasileiro. Estava, dessa forma, atrelada a todo um movimento de ideias e debates promovidos por nutrólogos que passaram a focalizar e denunciar a fome e as carências alimentares como problemas a serem superados no Brasil, em especial a partir da década de 1930, com a publicação de livros, criação de cátedras e institucionalização de agências criadas para esse fim. Neste período, a situação alimentar brasileira passou a ser amplamente conhecida em razão da divulgação dos primeiros inquéritos produzidos sobre o tema e publicados por médicos nutrólogos importantes para a área. Esses esforços nacionais caminharam em paralelo ao momento histórico em que a nutrição começava a se colocar como especialidade científica com possibilidades de formulação de políticas públicas

Bolsista: NICOLE DE MENEZES MACEDO
Orientador(a): LUIZ ANASTACIO ALVES
Resumo: Os receptores purinérgicos são expressos na membrana plasmática de diversos tipos celulares e são ativados por nucleotídeos e nucleosídeos extracelulares. Entre eles, o receptor P2X7 (P2X7R) destaca-se por suas funções relacionadas à inflamação e a dor. Ele é expresso principalmente em células da linhagem hematopoiética e do Sistema Nervoso Central, nas quais sua ativação constitui um “sinal de perigo”. Além disso, a ativação prolongada do P2X7R induz a formação reversível de um poro, o qual permite a passagem de moléculas de até 900 Da. O P2X7 é um receptor de perfil pró-inflamatório, uma vez que está relacionado com a ativação do inflamassomo e caspases, liberação de citocinas, transcrição de genes pró-inflamatórios e morte celular. Devido aos seus efeitos fisiológicos, ele já foi relacionado ao desenvolvimento de doenças inflamatórias, neurodegenerativas e dor, o que o torna um importante alvo terapêutico. Nesse contexto, diversos estudos já demonstraram que o uso de antagonistas do P2X7R produziu importantes efeitos anti-inflamatórios e antinociceptivos em modelos in vivo. Apesar disso, ainda não existem fármacos na clínica que sejam utilizados para o tratamento de doenças associadas a esse receptor, estimulando assim, a pesquisa por novos antagonistas. Nesse cenário, os produtos naturais emergem como uma importante fonte para a descoberta de novas moléculas com atividade antagonista, uma vez que apresentam uma riqueza em termos de biodiversidade de espécies e estruturas químicas. Além disso, já foram identificadas moléculas oriundas de produtos naturais com atividade sobre o P2X7R, entre elas, a amentoflavona oriunda da espécie vegetal Rheedia longifolia Planch & Triana. A atividade antagonista de extratos fúngicos oriundos do continente Antártico sobre o P2X7R também resultou no desenvolvimento de uma patente que recebeu anuência da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA). Recentemente, o nosso grupo de pesquisa vem se dedicando ao estudo e prática de screening virtual, que consiste em uma metodologia mais moderna para a descoberta de fármacos, porém, ainda pouco explorada para a pesquisa por novos antagonistas para o P2X7R. Entre as vantagens do screening virtual estão: economia de tempo, redução de gastos com reagentes e consumíveis, e análise seletiva quanto à interação da molécula-teste e o alvo-farmacológico. Nesse contexto, o objetivo desse projeto é a identificação de novos antagonistas para o P2X7R a partir da execução de screening virtual utilizando amostras de moléculas oriundas de produtos naturais. Para a realização do screening virtual, serão utilizados os programas de docking molecular Autodock Vina e DockThor com o modelo estrutural do P2X7R de rato (PDB ID: 6U9V). As moléculas oriundas de produtos naturais a serem testadas serão adquiridas através do banco de dados ZINC20. Simultaneamente, testaremos fármacos depositados no banco de dados Clue Repurposing, visando à descoberta de possíveis fármacos para reposicionamento. As moléculas selecionadas como candidatas serão adquiridas pelas empresas de origem para a realização dos testes in vitro a fim de identificar o seu IC50 em células da linhagem macrofágica J774.G8 e células HEK293T transfectadas com o P2X7 humano. Além disso, serão avaliadas a citotoxicidade e atuação inibitória dessas moléculas sobre algumas funções biológicas promovidas pela ativação do receptor P2X7, como a liberação da IL-1Beta e a produção de espécies reativas de oxigênio (EROS). Com isso, espera-se novos antagonistas para o P2X7 sejam descobertos com a possibilidade de avançarem para ensaios pré-clínicos, o que certamente irá contribuir para o campo de farmacologia dos receptores purinérgicos.

Bolsista: JULIA LIMA PECANHA
Orientador(a): RAFAELA VIEIRA BRUNO
Resumo: Os mosquitos Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) são os principais vetores de patógenos que causam doenças de importância médica como Dengue, Zika e Chikungunya (Valle et al. 2021). Estudos mostram que proteínas expressas na superfície das células desse inseto, agem como receptoras para que os vírus possam infectar as mesmas. Dentre elas está a Proibtina (Kuadkitkan et al. 2010). O gene proibitina tem como produto uma proteína que é altamente conservada e expressa de forma ubíqua em células eucarióticas, como as de mamíferos e mosquitos. Em Aedes aegypti, os vírus DENV e CHIKV parecem utilizar essa mesma proteína de membrana para entrar nas células, mesmo pertencendo a famílias distintas (DENV – Flaviviridae; CHIKV – Togaviridae) (Ghosh et al. 2019; Kuadkitkan et al. 2010; Sharma et al. 2020). Já foi visto que o gene proibitina 2 age como um regulador molecular do relógio circadiano em células de mamíferos (Kategaya et al. 2012). E, em estudos preliminares do nosso grupo, vimos que esse mesmo gene possui uma expressão cíclica em células Aag2 de Ae. aegypti (Fonseca et al. em preparação). Deste modo, acreditamos que nos mosquitos, esse gene possa ter uma expressão rítmica, o que poderia impactar diretamente na quantidade de vírus que infecta as células deste inseto ao longo do dia. Então, pretendemos analisar o perfil de expressão deste gene em Ae, aegypti ao longo de 24 horas em cabeças e corpos de fêmeas em diferentes estados fisiológicos (virgens, inseminadas e infectadas artificialmente).

Bolsista: SAMARA LUIZA ALVES DE QUEIROZ SILVA
Orientador(a): HUGO PERAZZO PEDROSO BARBOSA
Resumo: Estima-se que cerca de 650.000 pessoas estejam vivendo com vírus da hepatite C (HCV) no Brasil. Trata-se de uma doença silenciosa e pode evoluir para cirrose hepática e suas complicações. Ferramentas para diagnóstico por testes rápidos estão disponíveis. Apesar deste avanço tecnológico, a cascata de cuidado contínuo da hepatite C ainda é bastante deficiente no Brasil, pois apenas 10% dos indivíduos sabidamente portadores de hepatite C atingem a cura. Isto se explica pela escassez de rastreamento e poucas vagas disponíveis em centros terciários para tratamento da hepatite C por especialistas. Este sub-estudo do bolsista tem como objetivo principal avaliar a prevalência e fatores associados com presença de anticorpos para vírus da hepatite C (anti-HCV) em uma amostra de usuários de uma unidade de atenção básica de saúde no município do Rio de Janeiro (Clínica da Família Felippe Cardoso). Trata-se de um estudo transversal de rastreamento populacional por teste rápido para hepatite C. Usuários da Clínica da Família Felippe Cardoso (Penha – RJ) com idade entre 18-79 anos serão incluídos. Pessoas com idade < 18 anos ou ? 80 anos e aquelas em atendimento de urgência serão excluídos. Todos os indivíduos incluídos neste projeto serão submetidos à entrevista e teste imunocromatográfico rápido SD BIOLINE HCV® para detecção qualitativa de anticorpos específicos ao HCV (anti-HCV) em sangue de ponta de dedo. Após assepsia local com álcool 70%, uma pequena picada com uma lanceta estéril será realizada na ponta do dedo do participante e coletado sangue com pipeta capilar. Na sequência, o espécime retirado de sangue e 4 gotas do diluente de ensaio serão acrescentados no poço redondo (marcado com “S”) do cassete do teste. Leitura do teste será realizada 5-20 minutos após realização do teste rápido para HCV. Resultado será liberado para participante no mesmo dia do teste. As variáveis numéricas serão expressas por média ± desvio padrão ou mediana (intervalo) se ausência de distribuição normal. Variáveis categóricas serão expressas por valor absoluto (n) e frequência relativa (%). Os resultados produzidos por este projeto serão essenciais para geração de evidências para subsidiar estratégias de saúde pública custo-efetivas para diagnóstico da hepatite C no âmbito do SUS no Brasil. A melhora da cascata de cuidados contínuos na hepatite C, aumento do acesso ao tratamento e aceleração da cura do HCV auxiliará na (micro) eliminação da hepatite C.