Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição ZERO

Revista: Edição ZERO | Ano: 2022 | Corpo Editorial: Editorial | Todas edições: Todas
ISSN: 2966-4020
Avaliação da indução da atividade pró-autofágica na carga micobacteriana em macrófagos: avaliação pré-clínica in vitro
Bolsista: Rayná Guimarães Barbosa
Orientador(a): VERONICA SCHMITZ PEREIRA
Resumo: A hanseníase é uma doença infecciosa crônica que pode se manifestar em diferentes formas clínicas. No polo lepromatoso (LL), os pacientes apresentam múltiplas lesões de pele e são encontrados macrófagos altamente parasitados. Por outro lado, pacientes do polo tuberculoide (TT) podem apresentar lesão única de pele e raros bacilos são encontrados. Estudo anterior de nosso grupo demonstrou que há um bloqueio na autofagia dependente de beclina-1 em macrófagos presentes nas lesões de pele de pacientes LL quando comparados aos pacientes BT e que Mycobacterium leprae (M. leprae) é capaz de inibir o fluxo autofágico em macrófagos in vitro, o que pode ser revertido após o tratamento com IFNg ou Rapamicina. Em pacientes LL que desenvolveram episódios de reação reversa, uma condição clínica inflamatória aguda associada ao aumento das concentrações plasmáticas de IFNg, a ativação da autofagia foi restaurada. Também foi demonstrado que a morte de M. leprae em macrófagos humanos foi associada com o direcionamento da micobactéria para a autofagia e o bloqueio da via autofágica nas células infectadas foi capaz de restaurar a viabilidade da bactéria. Em conjunto, esses dados contribuem para uma maior compreensão dos mecanismos de controle micobacteriano associados aos pólos lepromatoso e tuberculóide, o que pode levar ao estabelecimento de novos alvos e estratégias terapêuticas de controle da hanseníase. Outros fármacos e suplementos nutricionais podem induzir a autofagia, como por exemplo, Verapamil, estatinas, Metformina, Resveratrol, vitamina D e ômega. O efeito pró-autofágico do Verapamil em pacientes com hanseníase ainda não foi investigado, deste modo, o objetivo geral desse projeto é investigar a capacidade deste fármaco em induzir a morte de M. leprae em macrófagos humanos, através da ativação da autofagia. Para alcançar esse objetivo, células THP1 ou mácrofagos derivados de monócitos humanos isolados pela técnica de Ficoll-Paque serão estimulados in vitro com M.leprae vivo e/ou diferentes concentrações do fármaco verapamil. A indução de autofagia será avaliada por duas metodologias distintas: microscopia e western blotting através da marcação de LC3. Nossa premissa é que esta substância sem função antimicrobiana descrita possa exercer essa atividade através do direcionamento de M. leprae para autofagia e consequentemente para a degradação e morte nos autofagolisossomos.
Estudo da infectividade in vitro de Leishmania infantum sob efeito do nocaute do gene para proteína flagelar PF16
Bolsista: Waleska Jackowski Bilous
Orientador(a): Lia Carolina A S Medeiros
Resumo: Leishmaniose é uma doença tropical negligenciada, com diferentes manifestações clínicas, cujos agentes etiológicos são parasitas unicelulares flagelados do gênero Leishmania spp. No Brasil, a Leishmaniose Visceral, forma mais grave da doença, é causada pelo parasita L. infantum. O tratamento quimioterápico realizado é bastante tóxico e antiquado, baseado em medicamentos antimoniais, que apresentam diversas desvantagens, e uma ferramenta vacinal eficiente ainda não está disponível. Por isso, espera-se identificar formas de modernizar o tratamento e prevenção. Nesse sentido, o flagelo da Leishmania apresenta papel crítico na interação parasita-hospedeiro, atuando na motilidade, morfogênese e divisão celular. Logo, é fundamental uma compreensão mais ampla do funcionamento das proteínas flagelares. Recentemente, Beneke, et al. (2019) utilizaram a técnica de CRISPR/Cas9 para nocautear diversos genes componentes do proteoma do flagelo da L. mexicana. Dentre eles, destacou-se o gene PF16, descoberto pela primeira vez em Chlamydomonas reinhardtii (BENEKE, et al., 2017). A inativação do gene PF16 em Chlamydomonas levou à perda do par central de microtúbulos e função flagelar anormal, mostrando que o PF16 é necessário para a motilidade flagelar e estabilidade do microtúbulo C1 do par central (STRASCHIL, et al., 2010). Nesse sentido, o defeito derivado do nocaute do gene resultou em paralisia total da L. mexicana, se assemelhando ao defeito do mutante PF16 Chlamydomona reinhardtii, indicando que a proteína é um componente axonemal bem conservado. O presente projeto, portanto, se propõe a obter e caracterizar parasitas nocaute para PF16 em L. infantum e avaliar sua capacidade infectiva. Mais especificamente, pretendemos realizar o nocaute do gene que codifica para a proteína flagelar PF16 em L. infantum por CRISPR-Cas9; avaliar a motilidade e comportamento do flagelo das formas promastigotas de L. infantum nocautes através de ensaios de motilidade por vídeo microscopia; e avaliar a capacidade de infecção in vitro de L. infantum nocautes em macrófagos derivados de células THP-1. Assim, o presente projeto visa abrir caminhos para a descoberta de novos alvos quimioterápicos na Leishmaniose em humanos, além de uma possível ferramenta vacinal.
Perfil clínico-epidemiológico da Tuberculose Drogarresistente na infância e adolescência no Brasil
Bolsista: Daniella Manhães Nogueira
Orientador(a): PAULO VICTOR DE SOUSA VIANA
Resumo: Introdução: As crianças com tuberculose (TB) têm sido historicamente uma população negligenciada, estima-se que cerca de 1 milhão de crianças desenvolvam TB a cada ano (WHO, 2021). No entanto, a maioria dessas crianças nunca é diagnosticada ou tratada para sua doença, e segundo estimativas recentes da Organização Mundial de Saúde (OMS) ocorreram 208.000 mortes de crianças devido à TB em todo o mundo em 2019 (WHO, 2021). A Tuberculose Drogarresistente a medicamentos (TBDR, referindo-se a qualquer resistência aos medicamentos para TB), especialmente TB multirresistente (TBMR, definida como Mycobacterium tuberculosis com resistência a pelo menos isoniazida e rifampicina), é uma ameaça contínua em crianças e adultos e mais de 30.000 crianças tinham TBMR no mundo em 2019. Até onde sabemos, ainda são escassos estudos que se concentraram em padrões de resistência a medicamentos, incluindo tuberculose monorresistente, TBMR, tuberculose polirresistente e tuberculose extensivamente resistente a medicamentos (TB-XDR) em crianças em todo o mundo, e muito pouco se sabe sobre a magnitude desta doença e sua resistência aos medicamentos em crianças (Jenkins et al., 2014; Ködmön et al., 2017). As principais razões, segundo alguns autores, são as dificuldades para um correto diagnóstico, uma vez que as crianças geralmente apresentam sintomas inespecíficos e a confirmação bacteriológica é difícil. A coleta de escarro é particularmente complexa em crianças menores de dez anos. Mesmo que amostras biológicas sejam obtidas, o resultado pode ser falso-negativo. Portanto, o diagnóstico de TB em crianças é um desafio, apesar da disponibilidade de tecnologias modernas, como os testes de amplificação de ácido nucleico (NAAT) (Marais et al., 2020). Objetivos: Descrever características clínicas e sociodemográficas, estimar a carga de adoecimento entre os casos de TBDR notificados nas crianças e adolescentes no Brasil. Metodologia: Estudo de coorte retrospectiva de casos de TBDR notificados no Sistema de Informação de Tratamentos Especiais de Tuberculose (SITETB), no período de 1º de janeiro de 2012 a 31 de dezembro de 2019. Serão excluídos os registros duplicados ou aqueles em que a situação de encerramento foi "mudança de diagnóstico". Este estudo explorará as seguintes covariáveis: sexo (masculino ou feminino); faixa etária (0-4 anos, 5-9 anos, 10-14 anos e 15-19 anos); raça/cor (branca, preta, parda, amarela e ignorada); forma clínica (pulmonar, extrapulmonar e mista); ano; padrão de resistência (monorresistência, multirresistência, polirresistência e resistência extensiva); tipo de resistência (primária ou adquirida) e tipo de entrada (caso novo, reingresso após abandono, falência, recidiva, mudança de resistência e outros). Serão realizadas análises das características clínicas e epidemiológicas dos casos TBDR notificados, a fim de caracterizar a população do estudo por meio de distribuições de frequências, medianas e intervalo interquartílico para as variáveis quantitativas serão calculadas. As diferenças entre as proporções entre os grupos serão comparadas utilizando-se o teste do qui-quadrado (?2) ou, quando a frequência esperada das tabelas de contingência for menor ou igual a 5, utilizará o teste exato de Fisher. Para as variáveis contínuas, foi utilizado o teste não paramétrico de Wilcoxon-Mann-Whitney. Um valor de p < 0,05 será considerado estatisticamente significativo. As análises deste trabalho serão implementadas no ambiente livre R 4.1.1. Por fim, o principal ensejo deste estudo é contribuir com a pesquisa científica e a formação de jovens pesquisadores no campo da saúde da pública, com vistas a ampliar o conhecimento sobre o controle e o acompanhamento dos casos de TBDR entre crianças e adolescentes do Brasil. Referências Bibliográficas Jenkins HE, Tolman AW, Yuen CM, Parr JB, Keshavjee S, Pérez-Vélez CM, et al. Incidence of multidrug-resistant tuberculosis disease in children: systematic review and global estimates. Lancet (London, England). (2014) 383:1572–9. doi: 10.1016/S0140-6736(14)60195-1 Ködmön C, van den BoomM, Zucs P, van derWerfMJ. Childhood multidrug- resistant tuberculosis in the European Union and European Economic Area: an analysis of tuberculosis surveillance data from 2007 to 2015. Euro Surv Bull Eur sur les Maladies Trans Eur Commun Dis Bull. (2017) 22:17- 00103. doi: 10.2807/1560-7917.ES.2017.22.47.17-00103 Marais BJ, Amanullah F, Gupta A, Becerra MC, Snow K, Ngadaya E, et al. Tuberculosis in children, adolescents, and women. Lancet Respir Med. (2020) 8:335–7. doi: 10.1016/S2213-2600(20)30077-1 WHO. Global Tuberculosis Report. (2021). Disponível em: https://www.who.int/publications/i/item/9789240037021
Diálogos deliberativos sobre a síntese necessidades e estratégias para atender pessoas com deficiência em emergências de saúde pública, em particular a pandemia do COVID-19
Bolsista: DEBORA RIBEIRO REZENDE
Orientador(a): Flávia Tavares Silva Elias
Resumo: Diálogo deliberativo a partir da síntese de evidências sobre necessidades e estratégias para atender pessoas com deficiência durante os períodos de emergência em saúde pública. A busca estruturada da literatura foi realizada entre janeiro e fevereiro de 2020 e nas bases de dados MEDLINE via Pubmed, Embase, Web of Science,), Biblioteca Virtual em Saúde (BVS), Colaboração Cochrane, PDQ-Evidence, Research, Evidence & Development Initiative (READ-IT/Effective Health Care Research Consortium (EHCRC)), Scielo. e norteada pela pergunta de pesquisa “Quais as necessidades e estratégias que podem ser adotadas durante o período da pandemia do COVID-19, para atender populações portadoras de deficiência? Os estudos incluídos demonstraram que as pessoas com deficiência ainda necessitam de maiores cuidados em momentos de emergências em saúde pública. Foram incluídos nesta revisão estudos que abrangeram oito categorias de estratégias que visavam mitigar os efeitos das emergências para as pessoas com deficiência, sendo: (1) habitação e infraestrutura; (2) Trabalho, ocupação e renda; (3) Planejamento e gestão; (4) Assistência Social; (5) Telessaúde; (6) Comunicação; (7) Atenção integral a Saúde; (8) Educação para pessoa com deficiência. Dentre as estratégias selecionadas, a maioria trazia abordagens exclusivas para pessoas com deficiência (85,8%), porém, também foram incluídas opções que podem ser incorporadas para atender necessidades da população em geral, com ou sem deficiência. Políticas de acesso e equidade em saúde são essenciais e devem ser formuladas contando com membros da comunidade, pois estes sabem elencar as prioridades, melhorias e dificuldades. Apesar de a saúde ser um direito de todos e ser teorizada no princípio da equidade, na prática ainda há muito o que fazer para que pessoas em vulnerabilidade tenham garantia de proteção social e de saúde. Espera-se com o diálogo obter elementos de implementação para contexto local, barreiras, apontando possíveis adaptações que seriam necessárias. O público do diálogo serão associações que representam pessoas com deficiência, trabalhadores de saúde e assistência social, gestores, pesquisadores de forma a obter opinião qualificada para guiar políticas para pessoas com deficiência implementando ações factíveis que promovam maior equidade e acesso a saúde em períodos de crise.
Avaliação da produção de IFN-? por células T de indivíduos infectados com Plasmodium vivax, usando ELISpot
Bolsista: Júlia Silva de Mattos
Orientador(a): Lis Ribeiro do Valle Antonelli
Resumo: Justificativa Indivíduos infectados com Plasmodium não desenvolvem imunidade esterilizante e podem ter a doença sucessivas vezes (OPATA et al., 2018). Além disso, alguns indivíduos infectados com P. vivax podem desenvolver a forma assintomática (ALMEIDA et al., 2021), perpetuando a transmissão da doença (SLATER et al., 2019). Sabe-se que a função efetora de células T é crucial para a imunidade protetora contra a malária. Entretanto, estudos envolvendo humanos infectados com o parasito são escassos. Este subprojeto, portanto, visa avaliar a resposta de células T, avaliando-se a produção de IFN-?, de indivíduos naturalmente expostos sintomáticos e assintomáticos, usando ensaios de ELISpot. Relevância A erradicação da malária requer uma abordagem combinada envolvendo todas as ferramentas de controle disponíveis, diagnóstico de infecções assintomáticas e uma vacina eficaz capaz de induzir respostas imunes protetoras (GANESHAN et al., 2016). Sabe-se que o estudo da imunidade adaptativa celular em indivíduos infectados pelo P. vivax é complexo e mal compreendido. Dessa forma, a identificação de epítopos de células T imunodominantes neste estudo poderá determinar possíveis candidatos vacinais e de diagnóstico de infecções assintomáticas em áreas endêmicas de malária. Objetivos Avaliar a produção de IFN-? por células T de indivíduos incluídos no projeto (portadores assintomáticos, indivíduos saudáveis e pacientes com malária aguda) estimuladas com 19 bibliotecas de peptídeos de Plasmodium vivax utilizando-se ELISpot; Avaliar a produção de IFN-? por células T de indivíduos dos três grupos experimentais, frente a uma biblioteca de 310 peptídeos de Plasmodium vivax através de ELISpot; Correlacionar esses dados com demais dados clínicos e laboratoriais obtidos pelo grupo de pesquisa. Metodologia Amostras de células mononucleares de sangue periférico (PBMC) de indivíduos dos grupos experimentais, pacientes sintomáticos e indivíduos assintomáticos e saudáveis, já foram coletadas e estão armazenadas a -80oC. Para a execução do ELISpot contra as bibliotecas de peptídeos será utilizado o protocolo padronizado por este grupo de pesquisa. Brevemente, placas multiscreen serão revestidas com anticorpos monoclonais anti-IFN-? humano diluídos em tampão bicarbonato. As placas serão incubadas a 4°C durante a noite e bloqueadas com RPMI por 1 hora. As placas serão subsequentemente lavadas 3 vezes com PBS 1X e PBMC (250.000 células/poço) de cada sujeito serão estimuladas com todos os pools de peptídeos. Posteriormente, as placas serão lavadas e incubadas com anticorpo monoclonal anti-IFN-? biotinilado por 2 horas; estreptavidina conjugada com fosfatase alcalina por 1 hora e, por fim, com um substrato cromogênico específico da enzima por 30 minutos à temperatura ambiente. O desenvolvimento da cor será determinado por lavagem das placas em água corrente e as placas secas ao ar à temperatura ambiente. Os spots serão contados utilizando o leitor de ELISpot. Análise estatística Os resultados serão compilados utilizando o software Excel e as análises estatísticas serão realizadas pelo Graphpad Prism 8.
Desinformação e fakenews contra a população LGBTI na internet: entre a verdade e a pós-verdade
Bolsista: Ariane Ribeiro Hilario dos Santos
Orientador(a): Adriano da Silva
Resumo: De acordo com o coletivo Intervozes (2019) a emergência da desinformação nos últimos anos, trouxe consigo o crescimento do conservadorismo, em especial, instrumentalizando a LGBTfobia, de modo a criar um pânico moral na sociedade, e assim deturpar as lutas por direitos dessa população. Para isso grupos conservadores tem se juntado em sites de mídias sociais, organizando ataques a partir da criação de notícias falsas, "assassinato de reputações", hashtags, etc. Deste modo, o presente subprojeto se alinha ao projeto "Caminhos do ódio nas redes digitais: características e impactos dos discursos de ódio contra mulheres e LGBTQIA+", de modo a contribuir com os objetivos do projeto para caracterizar as notícias e conteúdos desinformativos acerca da população LGBTQIA+. Uma vez que o subprojeto será desenvolvido no âmbito das ações do Núcleo de Informação e Documentação Cecília Minayo (NID/Claves), centro de documentação especializado no campo da violência e saúde, e integrado à Rede de bibliotecas da Fiocruz, faz-se necessário destacar a característica interdisciplinar na qual é pensado. A biblioteconomia, conforme postulado por Shiyali Ramamrita Ranganathan em 1931, é criada a partir de cinco leis, as quais, (1) os livros são para serem usados; (2) a cada leitor o seu livro; (3) a cada livro o seu leitor; (4) poupe o tempo do leitor; e (5) a biblioteca é um organismo em crescimento (RANGANATHAN, 2009). Em 2021 em dado o desenvolvimento social e tecnológico aferido nas últimas décadas, é necessário pôr as cinco leis em perspectiva, alinhando suas causas, às novas demandas. De acordo com Varela (2005, p. 2), o que caracteriza o século XXI, é o ilimitado desenvolvimento da ciência e tecnologia, gerador de novas necessidades e novas atitudes, e assim "configura-se uma sociedade que busca o conhecimento e novos modelos que possibilitem interpretar e compreender o mundo". Deste modo, para além dos livros, este campo do conhecimento passa a direcionar seu olhar para imensas quantidades de dados, em fluxos constantes, criados e armazenados em repositórios, acessíveis à dispositivos cada vez mais popularizados. No entanto, o contraponto de uma sociedade com mais acessos à variados conteúdos, em variados registros, é a emergência da sobrecarga informacional, um problema que não é novo, mas que contribui para um cenário de desinformação (JACOBY, 1984; BAWDEN, HOLTHAM, COURTNEY, 1999; INTERVOZES, 2019). Além disso, o cenário de uso de mídias sociais, (Facebook, Instagram, Twitter e Tiktok, etc.) e aplicativos de mensagens instantânea (Whatsapp, Facemessenger, Telegram, etc.) contribui para potencializar este problema (BERNES, 2021; INTERVOZES, 2021). Conforme explica Romeiro e Pimenta (2021), o desenvolvimento tecnológico das tecnologias de informação e comunicação, em consonância com um mundo mais conectado, torna as fronteiras entre campos das ciências sociais cada vez mais porosas, permitindo um tanto de possibilidades investigativas. Faz parte das competências da biblioteconomia a investigação de questões relacionadas à desinformação, na medida em que pode contribuir para identificação da informação falsa, ou desinformativas, e mesmo propor soluções em contextos multidisciplinares para contenção destas. Essas contribuições se dão a partir de temas próprios do campo da comunicação e da ciência da informação como competência em informação, competência em dados, e competência em mídia (ZATTAR, 2017; COSTAL, SALES, ZATTAR, 2020; ZATTAR, 2020).
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